NY_T 3002-2016饲料中动物源性成分检测 显微镜法.pdf

ICS 65.120B 46NY中华人民共和国农业行业标准NY/T 3002—2016饲料中动物源性成分检测显微镜法Analysis for the determination of constituents of animal origin in feed-Microscopy method2017-04-01实施2016-11-01发布中华人民共和国农业部-发布 NY/T3002—2016前言本标准按照GB/T1.12009给出的规则起草本标准由农业部畜牧业司提出。本标准由全国饲料T业标准化技术委员会（SAC/TC76）归口。本标准起草单位：中国农业大学。本标准主要起草人：刘贤、杨增玲、韩鲁佳、陈龙健、黄光群、肖卫华、姜训鹏、吕程序1 NY/T3002—2016饲料中动物源性成分检测显微镜法1范围本标准规定了饲料中动物源性成分的显微镜检测方法。本标准适用于饲料原料以及畜禽饲料中陆生动物肉骨粉和鱼粉的显微镜定性检测本标准方法的检山出限为0.1%（W/W）。2规范性引用文件下列文件对于本义件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件.其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T603化学试剂试验方法中所用制剂及制品的制备GB/T6003.1试验筛技术要求和检验第1部分：金属丝编织网试验筛GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法GB/T14699.1饲料采样GB/T20195动物饲料试样的制备3原理基于骨、软骨、肌纤维、羽毛、动物毛发以及鱼骨和鱼鳞等典型的、显微镜可识别的特征.对饲料原料和畜禽饲料中可能存在的动物源性成分进行鉴别分析。4试剂及制剂除另有说明，所用试剂均为化学纯。用水符合GB/T6682中三级水的规定。所用制剂制备应符合GB/T603的规定4.1浓缩剂四氯乙烯。4.2染色剂茜素红溶液：取2.5ml.1mol/l.盐酸置于100mL水中稀释，添加0.2g茜素红至该溶液。4.3封固剂4.3.1内醇4.3.2石蜡。4.3.3紫外固化光学胶4.4染色封固剂4.4.1斐林溶液：称取6.9g五水合硫酸铜溶于100ml.水中.制备溶液A；分别称取3-1.6g四水合酒石酸钾钠和12g氢氧化钠溶于100ml.水中.制备溶液B。使用前.取溶液A和溶液B按1：1(V/V)混合4.4.2胱氨酸溶液：分别称取2g醋酸铅和10g氢氧化钠.溶于100ml.水中。4.5清洗剂4.5.1乙醇：≥95%。4.5.2内酮4.6漂白剂I NY/T3002—2016次氯酸钠溶液：8%～11%有效氯5仪器和设备5.1分析天平：感量为0.001g和0.01g。5.2样品磨或研钵。5.3试验筛：筛孔尺寸1mm、500）um和250m.试验筛应符合（B/T6003.1的要求。5.4锥形玻璃分液漏斗：容积250ml..聚四氟乙烯或磨砂玻璃活塞.活塞开口直径应≥4mm。5.5生物显微镜：放大100倍～400倍.明场透射光5.6实验室常用玻璃器I。5.7玻片：平板载玻片、单凹载玻片和盖玻片（20mm×20mm）。5.8实验室用镊子、探针。5.9紫外灯：波长范围350nm～380nm5.10电热板（50℃）或酒精灯。5.11涡旋混合器。5.12电热1燥箱。6采样与试样制备6.1采样按（B/T14699.1规定的方法采样6.2试样制备为避免交叉污染，所有重复使用的设备使用前应仔细清洁。分液漏斗应拆分清洗，先人工预清洗，后清洗机清洗。试验筛应使用硬纤维刷进行清理。筛分鱼粉等含高脂质成分样品的试验筛，宜采用丙酮和气枪进行清理。6.2.1样品干燥水分含量≥14%的样品.处理前应使用电热十燥箱进行十燥［（103土2)℃］。6.2.2样品预筛分为避免物流等环节可能造成的交义污染·对于颗粒饲料和谷粒，宜采用1mm试验筛进行预筛分，筛上物和筛下物宜作为独立样品进行后续制备利分析。6.2.3分样与粉碎按GB/T20195规定的方法·抽取有代表性的样品，用四分法缩减取样不少于50g。粉碎过1mm试验筛混匀备用。6.2.4沉淀物的提取与制备准确称取10g试样（鱼粉、其他纯动物源性产品、矿物成分或沉淀物比例高于10%的预混料应称取3g）.精确至0.01g.置于分液漏斗中.加人50ml.四氯乙烯.连续振荡混合至少30s.再量取不少于50ml.四氯乙烯.连续沿分液漏斗内壁倒人彻底洗净着壁试样.静置5min.打开活塞.分离沉淀物于滤纸过滤后风十。准确称量风十后沉淀物（精确至0.001g）.统一过500m试验筛。若筛上物5%.应采用250um试验筛进行筛分。筛1物和筛下物两部分均应进行分析。注：上述操作应在通风柜内进行。6.2.5悬浮物的提取与制备倒置分液漏斗·将提取沉淀物后剩余的悬浮物从分液漏斗倒入表面IⅢ-风十后收集并准确称重（精确至0.