SN_T 3882-2014化学品 皮肤致敏试验 局部淋巴结法：BrdU-ELISA.pdf

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 3882—2014化学品皮肤致敏试验局部淋巴结法：BrdU-ELISAChemicals--Skin sensitization--Local Lymph Node Assay : BrdU-ELISA2014-08-01实施2014-01-13 发布中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局变再 SN/T 3882—2014前言本标准按照GB/T1.1-一2009 给出的规则起草。本标准技术性内容与联合国经济合作与发展组织（OECD)化学品测试方法442B（2010)《皮肤致敏试验:局部淋巴结法:BrdU-ELISA》(Skin sensitization: Local Lymph Node Assay: BrdU-ELISA)内容基本一致。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国上海出人境检验检疫局、中华人民共和国天津出人境检验检疫局。本标准主要起草人：蒋静、王艳、李小林、邱璐、栾慎顺、卞丽娜、张丽婷，I SN/T 3882—2014化学品‧皮肤致敏试验‧局部淋巴结法：BrdU-ELISA1范围本标准规定了动物皮肤致敏试验的试验原理、试验准备、试验步骤、观察、结果计算、数据和报告。本标准适用于检测化学品，包括纳米级和微粒级化学品对皮肤的致敏性检测。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单)适用于本文件。GB14924.1实验动物配合饲料通用质量标准GB14925实验动物　环境及设施3术语、定义和缩略语下列术语、定义和缩略语适用于本文件。3.1准确性‧accuracy检测方法结果和公开参考值一致性程度。它是测量试验方法程序和适用性。此术语通常也作“一致性”,表示与正确试验结果的相同程度。3.2基准测试物 benchmark test substance一种致敏或非致敏的物质，用来作为标准与检测物比较。基准测试物应具有以下属性：来源稳定可靠；与被检测物质在分类上结构和功能相似；物理/化学属性清楚；已知作用有支持数据；已知预期反应。3.3假阴性 faise negative某检测物被某检测方法错误地鉴定为阴性或或没有活性，而实际上它是阳性或有活性的。3.4false positive假阳性某检测物被某检测方法错误地鉴定为阳性或有活性的，而实际上它是阴性或或没有活性，3.5危害hazard不利于健康或生态效益的能力。只有在充足暴露水平才出现不利影响。3.6实验室间可重复性inter-laboratory reproducibility不同的有资质的实验室范围内测量，使用相同方法检测相同测试物，可产生定性的和定量的相似结果。实验室间的可重复性在预验证和验证过程中确定，它表示某检测可在实验室间成功转移的程度，同时也指实验室间的可重复性（between-laboratory reproducibility）。1 SN/T 3882-20143.7实验室内可重复性intra-laboratory reproducibility确定同一实验室有资质的人在不同时间使用指定方法可成功复制结果的程度。同时也指实验室内可重复性。3.8偏离outlier偏离是在一群中的一个随机样本的某个观察值明显不同于其他值。3.9质量保证quality assurance与试验室检测标准、要求、记录保存程序和数据转换的准确性有关管理方法，由独立于这些检测的个人进行评估。3.10可靠性reliability使用相同方法进行，某检测方法可在实验室内和实验室间可重复进行的程度的测量。计算实验室内和实验室间的重复性进行评估。3.11皮肤过敏skin sensitization当易感个体局部暴露于可产生诱导作用的化学过敏原产生的免疫学过程，可引起皮肤免疫反应形成接触过敏。3.12刺激指数stimulation index;SI用于评价测试物皮肤过敏性的计算方法，即处理组增殖与同步溶剂对照组的比率。3.13检测物test substance使用本方法检测的任何物质，包括单一化合物或多成分组成（如终产品，配合物）。检测制剂时，应考虑到某些制定规章的当局只要求检测终产品制剂。但也有要求检测某产品制剂活性成分。4试验原理LLNA：BrdU-ELISA基本原理是致敏物能够诱导接触位点淋巴结内淋巴细胞增殖，细胞增殖与致敏物的剂量和致敏力成正比，可对致敏性进行简单定量。通过比较试验组和溶剂对照组的平均增殖获得增殖数。试验组平均增殖和同步载体对照组的比率，即 SI≥1.6时，判定检测物为皮肤致敏物。本方法通过检测BrdU含量计算耳淋巴结中增生细胞数量。BrdU是一种胸苷类似物，可以合成进入增生细