培养基的灭菌
;培养基的灭菌
灭菌是指用物理或化学方法,完全杀死器物表面或培养基内的一切微生物的过程。培养基的灭菌是实现菌种纯培养的先决条件,通常采用湿热灭菌法,包括常压蒸汽灭菌(亦称流动蒸汽灭菌)和高压蒸汽灭菌两种形式。 ;1、灭菌设备
菌种培养基多在灭菌灶或灭菌锅中进行蒸汽灭菌。现将蒸汽灭菌所需设备、适用范围见表1-4。 ;表1-4 蒸汽灭菌所需设备及其适用范围;手提式高压蒸汽灭菌锅;2、培养基蒸汽灭菌方法
1)一次性常压蒸汽灭菌灶操作步骤
(1)往灭菌灶内注入八分水。
(2)将培养基按层次分别放人灶内,注意棉塞朝中间,且不靠灶壁排列,以利于蒸汽流动,否则影响灭菌效果,拖长灭菌时间。;(3)关闭灭菌灶门,点火加温(为缩短灭菌灶使用周期,提高灭菌灶的利用率,也可适当提前加温预热水)。
(4)灶门中部温度达到100℃时计算时间,保持6~8小时,注意灶内水位变化,避免干热燃烧现象发生。;(5)达到灭菌时间后停止加热,微开灶门,利用余热蒸发棉塞和容器表面水分,1~2小时后打开灶门,取出灭菌物放入预先消毒的冷却室。;2)高压蒸汽灭菌锅操作步骤
(1)装入灭菌培养基,注意棉塞朝内不朝壁,关闭锅门,紧固螺帽。
(2)缓慢将蒸汽通入夹层预热,达到压力4.9×104帕时,打开排气阀,将冷空气排出。;(3)当压力升到1.47×105帕,温度达到126℃时,控制进气量和排冷气阀门,使温度压力均恒保
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