SNT 2247-2009化学品 迟发型超敏反应试验方法.pdf

SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 2247---2009化学品迟发型超敏反应试验方法Chemicals--Test method of delayed type hypersensitivity2009-02-20 发布2009-09-01实施中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局 SN/T言本标准参考了中华人民共和国卫生部《保健食品检验和评价技术规范》（2003年版），其有关迟发型超敏反应(DTH)的试验方法的技术内容与上述规范完全一致，在标准文本格式上按GB/T 1.1一2000做了编辑性修改。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准负责起草单位：中华人民共和国江苏出人境检验检疫局。本标准参与起草单位：中华人民共和国天津出人境检验检疫局。本标准主要起草人：胡月珍、李宁涛、陈路、李征伟、魏洪兵。本标准系首次发布的出人境检验检疫行业标准。 SN/T 2247—2009化学品迟发型超敏反应试验方法1范围本标准规定了化学品的迟发型超敏反应试验的原理、试验方法和程序。本标准适用于化学品的迟发型超敏反应试验。2术语与定义以下术语和定义适用于本标准。2. 1迟发型超敏反应delayed type hypersensitivity,DTH致敏 T细胞再次与抗原接触,引起T细胞活化，释放出多种淋巴因子,导致局部组织以单核细胞为主的炎症。一般在 24 h～48 h 达高峰，由于出现时间较晚，故称迟发型超敏反应。2. 2细胞免疫cellular immunity由效应T细胞、巨噬细胞、NK细胞等介导的免疫反应，如迟发型超敏反应、移植物排斥、移植物抗宿主疾病等。3原理当致敏T细胞再次接触相同的抗原后，能引起局部的致敏淋巴细胞释放出多种淋巴因子，导致发生以单核细胞浸润为主的炎症，表现为皮肤红肿、硬结。硬结一般在抗原注射后约 18 h 出现,24 h～48 h达高峰，以后红肿和硬结自动消退。4试验方法4.1动物品、系选择选择健康成年小鼠，常用品系为昆明、LACA、BALB/C等，雌性与雄性动物均可，鼠龄在 6周～8周。试验动物房温度应保持22℃士3℃。相对湿度30%～70%，选用常规饲料，自由进食及饮水。4.2动物分组按随机方法将动物分为对照组及染毒组，每组动物10只。4.3染毒4.3.1染毒剂量通常设 3个剂量组,高剂量组为 1/5LDso～1/10LDso，低剂量组不引起任何免疫毒性，在低、高剂量间设中剂量组。4.3.2染毒途径及染毒次数依试验目的、人群常见接触途径、接触时间长短、急性还是慢性接触以及受试物的理化性质而定。5 试验步骤5.1染毒 14 d～30 d后，小鼠经腹腔或静脉注射 0.2 mL 2%羊红细胞(SRBC)(约 1×10° 个 SRBC)进行免疫。5.2小鼠免疫后 4 d,在其左后足跖部注射 20 μL 20%SRBC(约 1×10°个 SRBC)进行激发。5.3注射前及注射后24 h用游标卡尺测量左后足跖部厚度，用其厚度增加来表示，通常以mm计,每1 SN/T 2247—2009只动物测量3次，取其平均值。数据和报告66.1结果处理以表格形式列出每只动物编号、性别，以及在第二次注射抗原前及注射24 h 后用游标卡尺测量的足跖厚度,通常以 mm计。6.2结果评价根据染毒组与对照组的足跖厚度增加(mm)评价受试物对细胞免疫功能是否有影响及影响程度。6.3试验报告试验报告应包括以下内容：试验开始结束时间，实验室名称，试验负责人及试验者；-动物品、系，来源，饲养条件，动物室环境；一受试物的理化性质及配制方法，染毒时间染毒途径；-SRBC来源,取血时间及保存时间和条件；SRBC的处理及配制方法，动物免疫与激发条件包括途径和剂量；第二次抗原注射前及 24 h 后一侧足跖厚度测量结果,计算注射前后足跖厚度的差值;统计分析方法；结果评价。2 INS中华人民共和国出人境检验检疫行业标准化学品迟发型超敏反应试验方法SN/T 2247---2009*中国标准出版社出版北京复兴门外三里河北街16号邮政编码：100045网址 www. spc. net. cn电话：6852394668517548中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷*开本880×12301/16　印张0.5字数 4千字2009年5月第一版　2009年5月第一次印刷印数 1-—2 000*书号：155066·2-19746SN/T 2247-2009