NYT 1154.13-2008农药室内生物测定试验准则 杀虫剂第13部分：叶碟喷雾法.pdf

ICS 65.100B 17NY中华人民共和国农业行业标准NY/T 1154.13-2008农药室内生物测定试验准则杀虫剂第13部分：叶碟喷雾法Guideline for laboratory bioassay of pesticidesPart 13:Leaf-disc spraying method2008-05-16 发布2008-07-01实施中华人民共和国农业部 发布 NY/T 1154. 13—2008前言《农药室内生物测定试验准则杀虫剂》为系列标准：第1部分：触杀活性试验点滴法；第2部分：胃毒活性试验夹毒叶片法；第3部分：熏蒸活性试验锥形瓶法；第4部分：内吸活性试验连续浸液法；第5部分：杀卵活性试验浸渍法；-第6部分：活性试验浸虫法；第7部分：混配的联合作用测定；第8部分：滤纸药膜法；第9部分：喷雾法；一第10部分：人工饲料混药法；—第 11部分：稻茎浸渍法;一第12部分：叶螨玻片浸渍法；第13部分：叶碟喷雾法；-第14部分：浸叶法；本部分是《农药室内生物测定试验准则杀虫剂》的第13部分。本部分由中华人民共和国农业部提出并归口。本部分起草单位：农业部农药检定所。本部分主要起草人：嵇莉莉、林荣华、倪萍、姜辉、欧晓明、陶岭梅、张弘。1 NY/T 1154. 13—2008农药室内生物测定试验准则‧杀虫剂第13部分：叶碟喷雾法1范围本部分规定了叶碟喷雾法测定杀螨剂杀螨活性的试验方法。本部分适用于农药登记用杀螨剂室内生物测定试验。2仪器设备普通实验室常规仪器设备。2.1体视显微镜。2.2 孔径2 cm打孔器。2.3直径 9 cm海绵块。2.4　Potter喷雾塔。2.5恒温培养箱或恒温养虫室。3试剂与材料方法所用试剂，凡未指明规格者,均为分析纯;水为蒸馏水。3.1生物试材朱砂叶螨(Tetranychus cinnabarinnum Boisduval)、柑橘全爪螨(Panonychus citri Wcgregov)等螨类。3. 2 试验药剂原药（或母药）。3.3 对照药剂采用已登记注册且生产上常用农药的原药(或母药)，其化学结构类型或作用方式应与试验药剂相同或相近。4 试验步骤4.1试材准备选择室内饲养、生理状态一致的雌成螨。选取生长一致的寄主植物叶片（例如蚕豆叶片、棉花叶片、柑橘叶片等）,用打孔器做成叶碟，在培养皿内放置一湿海绵块,其上放滤纸,滤纸上放叶碟,每皿2个叶碟,将室内饲养的成螨或若螨接种到叶碟上，每叶碟15头～20头。4.2 药剂配制原药用有机溶剂(丙酮、二甲基亚砜、甲醇等)配置成母液,再用 0.05%～0.1% Triton X-100(或0.1%的吐温-80)水溶液按照等比或等差的方法配置5个～7个系列质量浓度。4.3Potter喷雾塔准备将 Potter 喷雾塔的喷雾压力调整在 1.47×105 Pa 的稳定状态，将洗净的喷雾头先用丙酮清洗 2次,再用蒸馏水清洗2 次。1 NY/T 1154. 13---20084.4药剂处理将培养Ⅲ皿置于 Potter 喷雾塔底盘进行喷雾,喷液量为 1 mL,药液沉降 1min后取出，转移至饲养条件下饲养。每处理不少于4次重复,并设不含药剂(含所有有机溶剂和乳化剂)的处理作空白对照4.5饲养与观察将处理的试虫置于温度为(25士1)℃、光周期L：D一（16：8）h条件下饲养和观察。特殊情况可以适当调整试验环境条件。4.6检查处理后 48h检查试虫死亡情况，分别记录总虫数和死虫数。根据试验要求和药剂特点，可以缩短或延长检查时间。5数据统计与分析5.1计算方法根据调查数据，计算各处理的校正死亡率。按公式(1)和(2)计算，计算结果均保留到小数点后两位：K×100.P=(1)N式中:P-—死亡率,单位为百分数(%);K一一表示死亡虫数,单位为头；-表示处理总虫数，单位为头。N-- P-P× 100(2)Pi =1一P.式中:P —-校正死亡率,单位为百分数(%);Pt一-处理死亡率,单位为百分数(%);-空白对照死亡率,单位为百分数(%）。P。若对照死亡率5%,无需校正;对照死亡率在5%～20%之间，应按公式(2)进行校正;对照死亡率20%,试验需重做。5.2 统计分析采用几率值分析的方法对数据进行处理。可以用SAS统计分析系统、POLO等软件进行统计分析,求出毒力回归线的LCso和 LCgo值及其95%置信限、b 值及其标准误差(SD)，评价供试药剂对生物试材的活性。6结果根据统计结果进行分析评价，写出正式试验报告。2 8000 /中华人民共和国农业行业标准农药室内生物测定试验准则杀虫剂第13部分：叶碟喷雾法NY/T 1154. 13--2008***中国农业出版社出版(北京市朝阳区麦子店街18号楼)（邮政编码：100125网址： )北京昌平环球印刷厂印刷新华书店北京发行