分子生物学实验.docVIP

分子生物学实验准备 【DNA提取】 准备 动物：联系小鼠4只 DNA提取试剂盒存放：RNase A1 -20℃；Solution C原液-4℃；其余室温 DNA提取试剂盒准备： Solution A、Solution B溶解； Rinse B加无水乙醇56ml混匀； Solution C制备：Solution C原液1.1ml+异丙醇68.75ml+异丁醇41.25ml加入Solution C空瓶中混匀，4℃保存 Elution Buffer :65℃水浴 托盘1、剪刀1大2小、镊子2、EP管12、研磨棒12、生理盐水、加样器、吸头500ul4盒100ul1盒、废液瓶4、100ml量筒1、PE手套1包 仪器：微量高速离心机1、65℃水浴箱1、微量光度计1 步骤 小鼠取肝：4只小鼠分8~12组/班 匀浆和细胞裂解： 1~100mg肝组织放入EP管中快速研磨成糊状 加入350ul的Solution A和0.9ul的RNase A1，快速研磨成匀浆 取350ul的Solution A冲洗研磨棒至EP管中，混匀65℃保温5min 将混合溶液转移至Collection Tube中，加入400ul的Solution B混匀，加入4℃的1ml的Solution C混匀，12000rpm离心2min 弃去上层有机相，加入4℃的1ml的Solution C 混匀，12000rpm离心2min 弃去上