【仪器分析实验】分子荧光法定量测定维生素B2的含量.pdfVIP

仪器分析实验报告 2008-2009 分子荧光法定量测定维生素 B 的含量 2 【实验目的】 ①掌握标准曲线法定量测定分析维生素 B 的基本原理； 2 ②了解荧光分光光度计的基本原理、结构及性能，掌握其基本操作。 【实验原理】 1 激发光谱和荧光光谱 任何荧光化合物都具有两种特征光谱：荧光激发光谱 （吸收光谱）—固定某一发射波长， 测定该波长下的荧光发射强度随激发波长变化所得的光谱。荧光发射光谱 （荧光光谱）—— 固定某一激发波长，测定荧光发射强度随发射波长变化得到的光谱。 2 荧光光谱的特点： ①斯托克斯位移（Stokes shift)。与激发光谱相比，荧光光谱的波长总是出现在更长的波 长处； ②荧光光谱与激发波长无关。无论用λ=250和350nm作激发光源，所得荧光光谱形状和峰的 位置都是相同； ③吸收光谱与发射光谱大致成镜像对称。 维生素 B 分子中有三个