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elisa检测梅螺旋体抗体的影响因素 elisa是一种高度敏感、特异性和重复性的实验诊断方法。然而，在实践中，有许多影响因素，因此对影响因素进行了一些探讨。 1 样品的影响因素 1.1 标本的非特异性显色 包括标本溶血、标本被细菌污染、标本保存时间过长、标本凝固不全和乳糜血等。标本溶血对ELISA的影响主要是反应孔对溶血血清中的血红蛋白的非特异性吸附和溶血时细胞内液对血清的稀释作用。Hb具有类过氧化酶活性,其作用与辣根过氧化物酶类似,如果反应孔非特异吸附Hb而残留,则可催化底物显色,使本底吸光度值升高甚至造成假阳性。当标本中抗体浓度与吸光度值呈线性关系时才会因溶血的稀释作用使吸光度值下降;当标本中抗体浓度近临界值时,可能造成假阴性。标本的污染菌体可能含有内源性辣根过氧化物酶,可使试验出现非特异性显色,使结果出现假阳性。标本在冰箱中保存过久,血清中IgG可聚合成多聚体,AFP可形成二聚体,在用间接法测定中会导致本底过深,甚至造成假阳性。冰冻保存的标本反复冻融产生机械剪切力对标本中的蛋白等分子有破坏作用,可引起假阴性结果。标本凝固不全的血清中含有部分纤维蛋白原,如将其加入微孔中,在ELISA测定过程中仍可以形成肉眼可见的纤维蛋白块,易使结果呈假阳性。乳糜血中的乳糜微粒会吸附于反应孔壁,可能造成非特异吸附,致使结果出现假阳性。 1.2 固相抗体与酶标二抗的激活作用 包括类风湿因子、补体