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elisa测定的影响因素及操作要点 elisa是一种常用的固相酶免疫吸附试验，是一种常见的固相酶免疫计量法。ELISA试验以灵敏度较高、特异性较好的特点在临床上得到了广泛的应用, 但ELISA测定中影响因素较多, 而且其操作中有一定的技术要求, 本文将从对ELISA测定中影响较明显的标本及操作因素两方面进行介绍。 1 样品因素对elisa的影响 1.1 elisa系统中互联反应型的检测 (1) 类风湿因子:人血清中IgM、IgG型类风湿因子 (RF) 可以与ELISA系统中的捕获抗体及酶标记二抗的FC段直接结合, 从而导致假阳性。解决该情况的办法是:检测抗原时, 可以用2-巯基乙醇等加入到标本稀释液中, 使RF降解。 (2) 补体:ELISA系统中固相一抗和标记二抗过程中, 抗体分子发生变构, 其FC段的补体C1q分子结合位点被暴露出来, 使C1q 可以将二者连接起来, 从而造成假阳性。解决的办法是:56℃, 30 min加热血清使C1q灭活。 (3) 交叉反应物质:类地高辛、类AFP样物质等, 是与靶抗原有交叉反应的物质。在用多抗测定抗原时对测定结果影响不大, 但在用单克隆抗体测定抗原时, 如果交叉抗原决定簇正好是所用单克隆抗体相对应的靶决定簇时, 也会出现假阳性结果。 (4) 标本中其它成分的影响:血清脂质过高、胆红素、血红蛋白及血液粘度过大等, 均对ELISA测定结果有干扰