第七章光学检测技术.docxVIP

本文由rvadikcy5q 贡献 ppt 文档可能在WAP 端浏览体验不佳。建议您优先选择TXT，或下载源文件到本机查看。第七章 光学检测技术 利用物质所具有的各种光学性质，对物质 进行定性、定量及结构分析的技术。 包括： 旋光检测、析光检测、荧光检测、 分光光度检测、散射光谱检测等。 生化领域常用：分光光度检测、旋光检测、 荧光检测 — 分光光度检测 又称分子吸收光谱检测，是利用物质分子 所特有的吸收光谱而对物质进行定性定量 测定的检测技术。 紫外分光光度检测（200～400nm） 可见光分光光度检测（400～760nm） 红外光分光光度检测（760～10000nm） 1 样品溶液的配备 （1）对各种光有选择性吸收特性的物质 （2）本身没有颜色的物质， 转变为有色 2 的物质溶液 2 样品的检测 选择好入射光的波长，空白液调零，测 定。 待测物质的定性分析 （1）将样品溶液在一定条件下（pH、温度、 缓冲液等）测得的吸收光谱与物质的标准吸收 光谱相对照，推断样品是什么。 （2）根据样品吸收光谱中峰顶与峰谷吸光度 之比值，与相当条件下资料所载的比值比较， 推断样品是什么。 如 ATP: OD280/OD260=0.85, OD250/ OD260=0.90 AMP: OD250/OD260=0.85, OD280/OD260=0.22 (3) 将分光光度检测与层析或电泳分离技术相配