组培苗生产技术—组培苗的培养与观察统计（植物组织培养课件）.pptx

外植体的离体培养技术 植物组织培养技术 八、试管苗的增殖培养 （一）继代培养中扩繁的方法1.切割茎段 2.分离芽丛 3.分离胚状体 4.分离根状茎 （二）继代培养中材料的接种方式1243 （三）培养基成分及培养条件对继代培养的影响1.苗分化数量少、速度慢、分枝少、个别苗生长细高??改进措施：增加细胞分裂素用量，适当降低温度，改善光照，改单芽继代为团块（丛芽）继代。 可能原因：细胞分裂素用量不足，温度偏高，光照不足。 ??可能原因：细胞分裂素用量过多，温度不适宜。3.分化率低,畸形,培养时间长时苗再次愈伤组织化??改进措施：减少或停用细胞分裂素一段时间，调节温度。 ??可能原因:生长素用量偏高,温度偏高。?改进措施：减少生长素用量，适当降温。 2.苗分化过多，生长慢，有畸形苗，节间极短，苗丛密集，微型化 4.叶粗厚变脆5.再生苗的叶缘、叶面等处偶有不定芽分化出来??可能原因：生长素用量偏高，或兼有细胞分裂素用量偏高。?改进措施：适当减少激素用量，避免叶片接触培养基。 可能原因：细胞分裂素用量偏高，或表明该种植物适于该种再生方式。??改进措施：适当减少细胞分裂素用量，或分阶段地利用这一再生方式。 6.丛生苗过于细弱，不适于生根或移栽?改进措施：减少细胞分裂素用量，免用赤霉素，延长光照时间，增强光照，及时转接，降低接种密度。 可能原因：细胞分裂素浓度过高或赤霉素使用不当，温度过高，光照短，光强不足，久不转移，生长空间窄。 7.幼苗淡绿，部分失绿可能原因：无机盐含量不足，pH值不适宜，铁、锰、镁等缺少或比例失调，光照、温度不适。改进措施：针对营养元素亏缺情况调整培养基，调好pH值，调控温度、光照。 ?改进措施：及时转接、降低接种密度，调整激素配比和营养元素浓度，改善瓶内气体状况，控制温度。 8.幼苗生长无力、发黄落叶、有黄叶、死苗夹于丛生苗中可能原因：瓶内气体状况恶化，pH值变化过大，久不转接导致糖已耗尽，营养元素亏缺失调，温度不适，激素配比不当。 外植体的离体培养技术 植物组织培养技术 九、试管苗的生根培养 这一阶段的目的是使第二阶段通过腋芽生长和不定芽形成途径得到的嫩枝生根产生小植株，以便移栽。 很多草本植物的不定根的形成是很容易的，但木本植物一般要困难些，其中从成年树得到的材料就更困难。由于生长的嫩枝本身含有丰富的生长素，所以一部分植物可在无激素的培养基上生根。 （一）生根培养基的要求：MS、B5、White等培养基，都可用于诱导生根，但是其含盐浓度要适当加以稀释；除White外，都富含N，P，K盐，它们都抑制根的发生。因此，应将它们降低到1／2，1／3或1／4，甚至更低的水平；生根培养基适当加大生长素的浓度，不用或少用细胞分裂素，生长素浓度在0.1-10mg/l，使用较多的是NAA，其次为IAA和IBA，生长素浓度过高时容易引起愈伤组织化和抑制根的生长； 培养基中蔗糖的浓度降低到1.0-1.5%，以增强植株的自养能力；培养基不宜过硬以免影响生根；可在培养基中加入1%左右的活性碳，为提高小植株的光合能力；可将光强度增加到3000-10000lux，光周期可用24小时光照或16小时。 （二）生根方法 ①将新梢基部浸入IBA溶液中处理4-8h； ②在含有生长素的培养基中培养4-6d； ③直接移入含有生长素的生根培养基中。 上述三种方法均能诱导新梢生根，但前二种方法对新生根的生长发育则更为有利。而第三种对幼根的生长有抑制作用。其原因是当根原始体形成后较高浓度生长素的继续存在，则不利于幼根的生长发育。不过这种方法比较可行。 另外，也可采用下列方法生根：1、延长在增殖培养基中的培养时间；2、有意降低一些增殖倍率，减少细胞分裂素的用量(即将增殖与生根合并为一步)；3、切割粗壮的嫩枝在营养钵中直接生根，此方法则没有生根阶段。可以省去一次培养基制作，切割下的插穗可用生长素溶液浸蘸处理，但这种方法只适于一些容易生根的作物。 4、少数植物生根比较困难时，则需要在培养基中放置滤纸桥，使其略高于液面，靠滤纸的吸水性供应水和营养，从而诱发生根。 5、嫁接到根系发达、抗逆性强的合适砧木上，如三倍体西瓜苗接到瓠子上，在25-30℃、饱和湿度条件下，三天伤口长出愈伤，一周