DB35T 1559-2016柑橘半穿刺线虫检疫鉴定方法.docxVIP

DB DB35/T 1559-2016 ICS 65.020.01 B16 福 建 DB35 省 地 方 标 准 DB35/T 1559—2016 柑橘半穿刺线虫检疫鉴定方法 Detection and identification of Tylenchulus semipenetrans Cobb. 2016 - 04 - 06 发布 2016 - 07 - 06 实施 福建省质量技术监督局 发 布 I DB35/T 1559-2016 前 言 本标准按照GB/T 1. 1-2009 《标准化工作导则 第1部分：标准的结构和编写》给出的规则编写。 本标准由中华人民共和国福建出入境检验检疫局提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和国福建出入境检验检疫局、福建农业职业技术院、福建农林大学。 本标准主要起草人：林星辉、林谷园、章淑玲、高小倩、李敏。 1 DB35/T 1559-2016 柑橘半穿刺线虫检疫鉴定方法 1 范围 本标准规定了柑橘半穿刺线虫鉴定依据、仪器用具及药品、 现场检疫和抽样、 实验室检疫鉴定、 形态鉴定特征、结果判定以及样本和样品保存与处理。 本标准适用于植物根系、土壤及生长介质中柑橘半穿刺线虫的检疫鉴定。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件， 仅注日期的版本适用于本文件。 凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。 GB 15569 农业植物调运检疫规程 SN/T 2122－2008 进出境植物及植物产品检疫抽样 3 鉴定依据 3.1 柑橘半穿刺线虫基本信息 中文名：柑橘半穿刺线虫 学 名： Tylenchulus semipenetrans Cobb,1913 柑橘半穿刺线虫隶属于线虫门Nematoda (Rudolphi,1808) Lankester,1877、侧尾腺纲Secernentea von Linstow,1905、垫刃目Tylenchida Thorne,1949、环总科Criconematoidea Taylor，1936、环科 Criconematoidae(Taylor,1936)Thorn,1949、半穿刺亚科Tylenchulinae Skarbilovich,1947、半穿 刺线虫属Tylenchulus Cobb,1913。 柑橘半穿刺线虫为营定居性寄生， 以二龄幼虫作为侵染虫态， 主要从寄主的营养根根尖侵入。其传 播途径主要依靠土壤、生长介质土和带根苗木等寄主植物材料的调运。 柑橘半穿刺线虫的其他信息参见附录B。 3.2 方法原理 将现场检疫中采集的植物根系、土壤以及生长介质样本， 送实验室经解剖检查、根系染色检查、贝 2 DB35/T 1559-2016 尔曼漏斗法分离获得线虫、制成临时或永久玻片， 显微镜下对成熟的雌虫、雄虫、二龄幼虫主要鉴定特 征仔细观察并测量数据， 依据本标准描述的柑橘半穿刺线虫形态鉴定特征、测量数据和基本生物学信息， 按系统分类方法，鉴定其生物学种类。 4 仪器、用具及药品 4.1 仪器及用具 体视显微镜、显微镜、倒置显微镜、电子天平、试管、漏斗、漏斗架、橡皮管、止水夹、分离浅盘、 面巾纸、培养皿、剪刀、刀片、烧杯、载玻片、盖玻片、酒精灯、挑针、记号笔、加热板、打孔器等。 4.2 药品 40%甲醛、甘油、石蜡、氯酸钠、酸性品红、 95%乙醇、三乙醇胺、蒸馏水等。 5 现场检验和抽样 5.1 现场检验 在田间或温室(大棚) 种植地、销售场地对柑橘半穿刺线虫的寄主植物进行检查， 查验植物体的生 长状况(长势) ，叶片是否有黄化褪绿、变小变薄， 枝梢变短， 开花减少， 座果稀疏， 花、果、叶脱落， 树势衰退等症状。采集上述可疑的植物根部和根际生长介质，送实验室作线虫分离。 5.2 抽样 当田间或温室(大棚) 地栽的植物没有明显症状表现时， 可采用对角线、棋盘式、平行跳跃式或拉 链式的随机取样方法， 确定取样点； 当田间或温室(大棚) 地栽的植物表现明显症状时， 对发病点的病 株根部及其周围的土壤进行取样。国内省际间调运的植株抽样数量应符合GB 15569的规定； 进出境的 植株抽样数量应符合SN/T 2122－2008的规定。 5.3 样品制作及保存 选定取样植株，在树冠滴水线以内，刨除表土、杂草，采集分布于10 cm~45 cm土层的营养根及根 系土壤。每株5点取样混合为一个样本， 每株至少采集500 g的根与根际土壤。将样本装入自封袋中， 扎 紧保持湿润， 并附上标签， 记录寄主、地点、症状特点及采集时间。在实验室对样本进行线虫分离与观 3 DB35/T 1559-2016