乳与乳制品中糖的测定—测定方法.pptx

乳与乳制品中糖的测定检测方法——高效液相色谱法一二试剂和材料三四仪器和设备分析步骤分析结果表述检测的试剂和材料（试剂和材料）1.乙腈 2.乙腈：色谱纯。 3.标准溶液 （1）乳糖标准贮备液（20mg/mL）：称取在94℃±2℃烘箱中干燥2h的乳糖标样2g（精确至0.1mg），溶于水中，用水稀释至100mL 容量瓶中。放置4℃冰箱中。 （2）乳糖标准工作液：分别吸取乳糖标准贮备液0 mL，1 mL，2mL，3mL，4mL，5mL于10mL 容量瓶中，用乙腈定容至刻度。配成乳糖标准系列工作液，浓度分别为0mg/mL，2mg/mL，4mg/mL，6mg/mL，8mg/mL，10mg/mL。检测的试剂和材料（试剂和材料） （3）蔗糖标准溶液（10 mg/mL）：称取在105 ℃ ±2 ℃烘箱中干燥2h 的蔗糖标样1 g（精确到0.1 mg），溶于水中，用水稀释至100mL容量瓶中。放置4 ℃冰箱中。 （4）蔗糖标准工作液：分别吸取蔗糖标准溶液0mL，1mL，2mL，3mL，4mL，5mL于10 mL 容量瓶中，用乙腈定容至刻度。配成蔗糖标准系列工作液，浓度分别为0mg/mL，1mg/mL，2mg/mL，3mg/mL，4mg/mL，5mg/mL。检测的仪器和设备（仪器和设备）1. 天平（感量为0.1 mg）2. 高效液相色谱仪，带示差折光检测器或蒸发光散射检测器3. 超声波振荡器1. 试样处理（分析步骤）固态试样1g或液态试样2.5g→50mL容量瓶中→加15mL、50℃～60℃水→溶解→超声波振荡10min →乙腈定容→静置数分钟→过滤。取5.0mL滤液→ 10mL容量瓶中→乙腈定容→0.45μm滤膜过滤→滤液供色谱分析。 2. 测定——参考色谱条件（分析步骤） 色谱柱：氨基柱4.6mm ×250mm，5μm ； 流动相：乙腈:水=70:30 ； 流速：1mL/min； 柱温：35℃； 进样量：10μL； 示差折光检测器条件：温度33 ℃～37℃； 蒸发光散射检测器条件：飘移管温度：85℃～90℃； 气流量：2.5 L/min； 撞击器：关。2. 测定——标准曲线的制作（分析步骤）将标准系列工作液分别注入高效液相色谱仪中，测定相应的峰面积或峰高，以峰面积或峰高为纵坐标，以标准工作液的浓度为横坐标绘制标准曲线。标准曲线示例图2. 测定——试样溶液的测定（分析步骤）将试样溶液注入高效液相色谱仪中，测定峰面积或峰高，从标准曲线中查得试样溶液中糖的浓度。计算公式（分析结果表述） c×V×100×n X= ———————— m×1000 式中： X——试样中糖的含量，g/100g； c—— 样液中糖的浓度，mg/mL； V——试样定容体积，Ml； n—— 样液稀释倍数； m——试样的质量，g。乳与乳制品中糖的测定检测方法——莱因-埃农氏法一二试剂和材料三四仪器和设备分析步骤分析结果表述一、检测的试剂和材料（试剂和材料） 1.乙酸铅溶液（200 g/L）； 2.草酸钾—磷酸氢二钠溶液； 3.盐酸（1+1）； 4.氢氧化钠溶液（300 g/L）； 5.费林氏液（甲液和乙液）； 6.酚酞溶液（5 g/L）； 7.次甲基蓝溶液（10 g/L）。二、检测的仪器和设备（仪器和设备）1. 天平（感量为0.1 mg）2. 水浴锅：温度可控制在75℃ ±2℃。三、分析步骤（一）费林氏液的标定 （分析步骤）1.用乳糖标定（1）称取预先在94℃烘箱中干燥2h的乳糖标样约0.75g →用水溶解并定容至250mL →将此乳糖溶液转入50mL滴定管中，待用。三、分析步骤（一）费林氏液的标定 （分析步骤）1.用乳糖标定 （2）预滴定：取10mL费林氏液→三角瓶→加20mL蒸馏水→从滴定管中放15mL样液→三角瓶→电炉上加热→2min内沸腾，保持微沸15s→加3滴次甲基蓝溶液→继续滴定→至蓝色褪尽→记录样液消耗体积。（3）精确滴定：另取10mL费林氏液→三角瓶→加20mL蒸馏水→加比预滴定量少1.0mL的样液→电炉上加热→2min内沸腾，维持微2min→加3滴次甲基蓝溶液→缓慢滴定→至蓝色褪尽→记录样液消耗体积。三、分析步骤（一）费林氏液的标定 （分析步骤） （4）按式（1）、（2）计算费林氏液的乳糖校正值（f1）： …………………………（1） ………………………………（2） 式中： A1——实测乳糖数，mg；V1——滴定时消耗乳糖溶液的体积，mL；m1——称取乳糖的质量，g；AL1——由乳糖液滴定毫升数查乳糖及转化糖因数表所得的乳糖数，mg。三、分析步骤（一）费林氏液的标定 （分析步骤）2.用蔗糖标定（1）取在105℃烘箱中干燥2h的蔗糖约0.2g→用50mL水溶解并洗入100mL容量瓶中→加水10mL→加10mL盐酸→置75℃水浴锅中→使溶液温度在67.0℃～69