霉菌和酵母菌的形态观察
霉菌的形态观察
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基本原理
霉菌的菌丝体及孢子的形态特征是识别不同种类霉菌的重要依据。
霉菌菌丝和孢子的宽度通常比细菌和放线菌粗得多,通常是细菌菌体宽度的几倍至几十倍,因此用低倍显微镜即可观察。
直接制片观察法
基本原理:菌丝粗大,细胞易收缩变形,且孢子容易分散,因此将培养物置于乳酸石碳酸棉蓝染色液中,制成制片镜检。
制成标本特点:细胞不变形,有杀菌防腐作用,不易干燥,且保持较长时间;防止孢子飞散,溶液本身呈蓝色,能增强反差。
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操作步骤:①干净的载玻片上,滴一滴乳酸石碳酸棉蓝染色液;②用解剖针从霉菌尽量的边缘处取少量带有孢子的菌丝,先置于50%的乙醇中浸以下,以洗去脱落的孢子,再置于染色液中;③小心将菌丝挑散开,然后盖上盖玻片,置显微镜下观察。
载玻片培养观察法
基本原理:接种霉菌于载玻片上的适宜培养基上,接种盖上盖玻片培养,霉菌就在载玻片和盖玻片之间的有限空间内沿盖玻片横向生长。培养一段时间后,将载玻片上的培养物置于显微镜下观察。
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步骤:
①培养小室灭菌:将略小于培养皿底内径的滤纸放入皿上,再放上U型玻璃棒,其上放一洁净的载玻片,然后将两个盖玻片分别放在载玻片的两端,盖上皿盖,将数套如此的培养皿叠起,包扎好,121℃灭菌20分钟或干热灭菌备用。
②琼脂块的制作:取已灭菌的马铃薯琼脂培养基6~7mL注入另一灭菌的平皿中,使之凝固成薄片。用解剖刀
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