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- 2023-08-22 发布于上海
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产气荚膜酸菌β、ε毒素不同片段的融合表达及免疫原性研究的中期报告
本研究旨在构建含有产气荚膜酸菌(Clostridium perfringens)β和ε毒素不同片段的融合蛋白,并分析其免疫原性。研究分为以下两个主要部分:
一、融合蛋白表达构建
1. 获得β和ε毒素不同片段的基因序列
通过PCR扩增和基因合成方法得到了β和ε毒素不同片段的基因序列。
2. 构建融合表达载体
将β和ε毒素不同片段的基因进行连接,并将连接后的基因序列克隆到pET28a载体中,最终得到融合表达载体。
3. 蛋白表达与纯化
将融合表达载体转化到大肠杆菌BL21(DE3)中,诱导表达,并进行蛋白的纯化。
二、免疫原性研究
1. 抗体制备
将纯化后的融合蛋白免疫小鼠,制备抗体。
2. 免疫原性检测
使用Western blot和ELISA等方法检测融合蛋白在小鼠血液中的免疫原性,探究其在产生抗体方面的潜力。
目前研究已完成融合蛋白的构建、表达与纯化,正在进行免疫原性的检测。预计本研究的结果将为开发针对β和ε毒素的疫苗提供新思路。
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