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植物生理学实验
植物细胞死活的鉴定和植物组织渗透势的测定
------质壁分离法
姓名
学号
系别
班级
实验日期
同组姓名
Part I 植物细胞死活的鉴定
一、摘要
植物活细胞是一个渗透系统,当其处于高渗溶液中时,细胞失水,原生质体体积缩小,发生质壁分离现象。若将发生质壁分离的细胞转移至低渗溶液中,细胞会重新吸水,原生质体膨胀,质壁分离复原。由于死细胞的质膜失去半渗透性,不能发生质壁分离复原现象。因此质壁分离法可用于鉴定植物细胞的死活。
二、实验原理与实验目的
实验原理
植物细胞是一个渗透系统。当细胞处于比其水势低的高渗透溶液中时,细胞由于失水而使原生质体体积缩小,从而引起质壁分离。当提高细胞外溶液的水势,使其大于细胞内的水势时,细胞重新吸水,原生质体体积膨胀,可见质壁分离复原。
活细胞与死细胞的膜在性质上有许多差别,特别是透性的变化最为明显;因此活细胞在高渗溶液中能产生质壁分离,而死细胞不能产生质壁分离现象,即可以此鉴定。
实验目的
利用质壁分离现象验证植物细胞的死活。
三、材料和方法
植物材料:洋葱鳞茎
实验器材:显微镜、载玻片、盖玻片、镊子、解剖针、刀片、酒精灯、滤纸、滴管、移液管、小培养皿
实验试剂:1mol/L蔗糖溶液
四、实验步骤
1取洋葱鳞片内表皮一小块,放在有1-2滴蒸馏水的载玻片上,盖上盖玻片并在显微镜下观察其自然状态,并绘图示细胞状态。
2在盖玻片的一边加上2-3滴1mol/L的蔗糖溶液,同时在对边用滤纸片吸去水分,使植物材料换入蔗糖溶液中。在显微镜下连续观察细胞有何变化,并绘图示细胞状态。
3观察后,即可从载玻片的一边小心加蒸馏水数滴,同时用滤纸缓慢的从另一边吸蔗糖溶液,反复进行数次以洗去蔗糖溶液,将材料又换入蒸馏水中。在显微镜下观察细胞又有何变化?并解释其原因。
4另取洋葱鳞片内表皮一小块,放在已加有数滴蒸馏水的载玻片上。先在酒精灯火焰上小心加热2-3分钟把植物细胞杀死。待冷却后于载玻片上加2-3滴1mol/L蔗糖溶液,盖上盖玻片进行镜检,看是否发生质壁分离。
结果与讨论
质壁分离前图 质壁分离后洋葱细胞图
讨论:
分析细胞质壁分离现象产生的条件及原因:条件是首先需要具备大 \t /_blank 液泡,原生质层的内外溶液浓度要具有浓度差。植物活细胞是一个渗透系统,当 \t /_blank 植物细胞外界的浓度要高于 \t /_blank 细胞液的浓度时,细胞失水,原生质体体积缩小,又因为 \t /_blank 原生质层相当于 \t /_blank 半透膜,伸缩性比 \t /_blank 细胞壁大,所以会逐渐发生 \t /_blank 质壁分离。
参考文献
《植物生物学实验指导》
Part II 植物组织渗透势的测定
摘要
利用植物活细胞的质壁分离及其复原现象,可测定植物组织的渗透势。当植物细胞或组织放在外界等渗溶液中时,组织与外界溶液的水分交换达到动态平衡,植物细胞处于初始质壁分离状态,细胞压力势为零,溶液的渗透势即等于所测植物的渗透势(压力势为零的水势)。用一系列梯度浓度溶液浸泡组织,并观察细胞质壁分离现象。能引起植物组织细胞发生初始质壁分离的溶液浓度或介于发生质壁分离的溶液和相邻没有发生质壁分离的溶液之间的浓度,即为等渗浓度。根据公式计算植物组织的渗透势。
二、实验原理与实验目的
实验原理
在一系列预先准备好的试液中寻找能引起生活组织里约一半的细胞发生质壁分离的溶液。即把一组同一目的的样品放置在一系列按照渗透势逐渐减低排列的蔗糖溶液里,并浸泡30分钟,然后转移到放有1-2滴同一浓度溶液的载玻片上,观察质壁分离发生的情况。镜检约50个细胞。若发生质壁分离,计算初始质壁分离细胞占镜检细胞数的百分比;若达50%,则细胞液的渗透势等于该浓度溶液的渗透势。或确定刚刚引起初始质壁分离和其相邻的尚不能引起质壁分离时溶液浓度的平均值,作为等渗浓度,代入公式ψs=-iCRT中计算出植物组织渗透势。
实验目的
利用质壁分离现象测定植物组织的渗透势.
三、材料和方法
植物材料:洋葱鳞茎
实验器材:显微镜、载玻片、盖玻片、镊子、解剖针、刀片、酒精灯、滤纸、滴管、移液管、小培养皿
实验试剂:1mol/L蔗糖溶液
四、实验步骤
1.在测定组织渗透势前先用1mol/L蔗糖溶液依C
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