酶工程最终版.pdfVIP

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第一章绪论 1.何谓酶工程,试述其主要内容和任务. 酶的生产、改性与应用的技术过程称为酶工程。 酶工程的主要内容包括:微生物细胞发酵产酶,动植物细胞培养产酶,酶的提取与分离纯化,酶分子 修饰,酶、细胞、原生质体固定化,酶非水相催化,酶定向进化,酶反应器和酶的应用等。精品文档放心下 载 酶工程的主要任务是经过预先设计,通过人工操作获得人们所需的酶,并通过各种方法使酶的催化 特性得以改进,充分发挥其催化功能。精品文档放心下载 2 。酶有哪些显著的催化特性? 酶是生物催化剂,与非酶催化剂相比,具有专一性强、催化效率高和作用条件温和等显著特点。谢谢阅读 3.简述影响酶催化作用的主要因素。 酶的催化作用受到底物浓度、酶浓度、温度、pH、激活剂浓度、抑制剂浓度等诸多因素的影响。谢谢阅读 5.简述酶活力单位的概念和酶活力的测定方法。 酶活力单位:在特定条件下(温度可采用 25℃,pH 等条件均采用最适条件),每 1min 催化 1 μmol 的 底物转化为产物的酶量定义为 1 个酶活力单位,这个单位称为国际单位(IU)。在特定条件下,每秒催化 1mol 底物转化为产物的酶量定义为 1 卡特(kat )谢谢阅读 酶活力的测定方法:振荡测定法,酶柱测定法,连续测定法, 固定化酶的比活力测定,酶结合效率与酶活 力回收率的测定,相对酶活力的测定。或者测定方法:化学测定法、光学测定法、气体测定法精品文档放心下载 其它。 酶的发展历史:4000 多年前的夏禹时代--酿酒技术。3000 多年前的周朝——制造饴糖、食酱等食品。 1833 年--佩恩和帕索兹从麦芽的水抽提物中得到淀粉酶 .19 世纪中叶—- 巴斯德对酵母的乙醇发酵进行研 究.1913 年—-米彻利斯和曼吞根据中间产物学说,推导出米氏方程。1926 年--萨姆纳得到脲酶结晶,并 证明它具有蛋白质的性质.1960 年——雅各和莫诺德提出操纵子学说。1982 年——切克发现核酸类 酶.1983 年—-阿尔特曼发现核糖核酸酶 P 的 RNA 部分 M1RNA 具有核糖核酸酶 P 的催化活性。精品文档放心下载 酶的专一性分为绝对专一性和相对专一性。相对专一性又可分为键专一性和基团专一 性米氏方程:感谢阅读 酶的可逆性抑制作用可以分为竞争性抑制、非竞争性抑制和反竞争性抑制。谢谢阅读 Km 增大 不变 减小 Vm 不变 减小 减小 酶的生产方法:提取分离法,生物合成法,化学合成法 第二章 经过预先设计,通过人工操作,利用微生物的生命活动获得所需要的酶的技术过程,称为酶的发酵生产。感谢 阅读 酶的发酵生产是当今产酶的主要方法,因为微生物具有种类多、繁殖快、易培养、代谢能力强等特点。谢谢 阅读 1. 试述酶生物合成的基本过程。 a . RNA 的生物合成——转录:转录的起始、RNA 链的延伸、转录的终止、RNA 前体加工成为成熟的 RNA 谢 谢阅读 分子。 b.蛋白质的生物合成—-翻译:氨基酸活化生成氨酰-tRNA 、肽链合成的起始、肽链的延伸、肽链合 成的终止、蛋白质前体加工修饰成具有特定空间结构的功能蛋白。感谢阅读 2. 何谓酶生物合成的诱导作用?是简述其原理。 加入某些物质使酶的生物合成开始或加速进行的现象,称为酶生物合成的诱导作用。精品文档放心下载 原理:当无诱导物存在时,调节基因产生的阻遏蛋白与操纵基因结合,覆盖 RNA 聚合酶的结合部位, RNA 聚合酶无法与启动基因结合,结构基因无法转录,酶合成受受阻。当诱导物存在时,其与阻遏蛋白 结合,使阻遏蛋白构象发生改变而降低与操纵基因的结合能力,RNA 聚合酶与启动基因结合,结构基 因正常转录,相应酶得以表达。感谢阅读 3. 什么是酶生物合成的反馈阻遏作用?试简述其原理. 酶生物合成反馈阻遏作用指酶催化反应的产物或代谢途径的末端产物使酶的生物合成受到阻遏.感谢阅读 原理:无阻遏物存在时,调节基因产物阻遏蛋白无法与操纵基因结合,结构基因正常转录,相应酶得以 正常表达。当阻遏物存在时,其与阻遏蛋白结合使之空间构象发生改变,阻遏蛋白与操纵基因结合,抑精 品文档放心下载 制 RNA 聚合酶与启动基因的结合,下游结构基因

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