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核苷酸和核酸Nucleotide and Nucleic Acid 第一节 引 言 核 酸(nucleic acid) 是以核苷酸为基本组成单位的生物大 分子，携带和传递遗传信息。 是一类重要的生物大分子，担负着生命信息的储存与传递。 是现代生物化学、分子生物学的重要研究领域，是基因工程操作的核心分子。 一、核酸的发现和研究工作进展 1868年 Fridrich Miescher从脓细胞中提取“核素” 1944年 Avery等人证实DNA是遗传物质1953年 Watson和Crick发现DNA的双螺旋结构1968年 Nirenberg发现遗传密码1975年 Temin和Baltimore发现逆转录酶1981年 Gilbert和Sanger建立DNA 测序方法1985年 Mullis发明PCR 技术1990年 美国启动人类基因组计划(HGP) 1994年 中国人类基因组计划启动2001年 美、英等国完成人类基因组计划基本框架 二、如何证明核酸是遗传物质的载体？１９４４年O.T.Avery的细菌转化实验是获得DNA携带遗传信息的第一个证明；１９５２年Alfred D.和Hershey等人建立的T2噬菌体捣碎的实验，这是第二个证据，证明噬菌体复制的物质是DNA而不是蛋白质外壳；1953年 Watson和Crick的DNA双螺旋模型的发现，更进一步揭示了DNA作为遗传物质储存和信息传递的化学机制；核酶的发现，一些核酸本身具有酶催化的活性。 1944年，Avery的转换转化实验orand可分离 98％核中（染色体中） 真核 线粒体（mDNA） 核外 叶绿体（ctDNA）DNA 拟核 原核 核外：质粒（plasmid） 病毒：DNA病毒三、核酸的种类和分布 核酸分为两大类： 脱氧核糖核酸 Deoxyribonucleic Acid （DNA） 核糖核酸 Ribonucleic Acid（RNA） RNA主要存在于细胞质中 tRNA rRNA mRNA 其它 RNA病毒：SARS四、分子生物学的中心法则 第二节核酸的基本化学组成 核酸的化学组成 1. 元素组成C、H、O、N、P（9~10%）2. 分子组成—— 碱基(base)：嘌呤碱，嘧啶碱—— 戊糖(ribose)：核糖，脱氧核糖—— 磷酸(phosphate) 一、核苷酸的结构 组成核酸的戊糖有两种。DNA所含的糖为 β-D-2-脱氧核糖；RNA所含的糖则为β-D-核糖。RiboseDeoxyribose1. 戊糖 嘌呤(purine) 腺嘌呤(adenine, A)鸟嘌呤(guanine, G)2. 碱基 嘧啶(pyrimidine)胞嘧啶(cytosine, C)尿嘧啶(uracil, U)胸腺嘧啶(thymine, T) 核苷：AR, GR, UR, CR脱氧核苷：dAR, dGR, dTR, dCR3. 核苷和核苷酸的结构碱基和核糖（脱氧核糖）通过糖苷键连接形成核苷（脱氧核苷）。1′1 核苷酸：AMP, GMP, UMP, CMP脱氧核苷酸：dAMP, dGMP, dTMP, dCMP 核苷（脱氧核苷）和磷酸以磷酸酯键连接形成核苷酸（脱氧核苷酸）。 4、多聚核苷酸 多聚核苷酸是通过一个核苷酸的3’-醇羟基 与另一个核苷酸的5’-磷酸基形成3’,5’-磷酸二酯键相连而成的链状聚合物。5’5’3’3’ 多聚核苷酸的结构特征主链是相间出现的磷酸戊糖残基通过共价键连接；各种碱基排在主链外侧；磷酸二酯键在主链中取向相同从5’ 3’； 线性结构有3’和5’末端，即在3’位置上缺乏核苷酸残基，5’末端即在5’位置上缺乏核苷酸残基。3’端有游离的羟基，5’端有游离的磷酸基。 A G P5? P T PG PC PT P OH 3? 书写方法5? pApCpTpGpCpT-OH 3? 5? A C T G C T 3? 5′-磷酸端（常用5’-P表示），3′-羟基端（常用3’-OH表示）；多聚核苷酸链具有方向性，当表示一个多聚核苷酸链时，必须注明它的方向是5′→3′或是3′→5′；戊糖用垂直竖线表示，五个C从上到下依次为1′→5′。 5. 体内重要的游离核苷酸及其衍生物含核苷酸的生物活性物质： NAD+、NADP+、CoA-SH、FAD 等都含有 AMP 多磷酸核苷酸：NMP，NDP，NTP