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蛋白质的生物合成第一节 中心法则 解释、说明遗传信息的流动、传递过程。 包括:Replication Transcription Translation基因的功能:遗传——DNA自我复制基因表达——活性蛋白质三种RNA在蛋白质合成中的功能: mRNA -- 模板 tRNA -- 氨基酸载体 rRNA -- 场所
自我复制转录反转录自我复制翻译蛋白质Central dogma(Crick, 1958)
第二节 遗传密码一、遗传单位/密码单位什么是遗传密码? 指mRNA中核苷酸的排列顺序。密码子——Codon / Triplet code mRNA上三个相邻的核苷酸序列。?WHY?实验证据:(Nirenberg, 1961) 以14C标记的氨基酸为原料,poly U——由Phe组成的多肽poly U-G——Cys-Val相间排列的多肽poly A-C——Trp-His相间排列的多肽
第二节 遗传密码一、遗传单位/密码单位 密码子编码什么?(或:密码子的含义)氨基酸——除Met外,其它氨基酸都有多个密码子。?WHY?终止信号——UAG、UAA、UGANB 起始密码:AUG (还表示Met,原核与真核生物有所不同)判断正误:相邻3个碱基代表1个氨基酸?
第二节 遗传密码二、遗传密码的基本特性 (p 294-297)读码方向:5’-P端 ? 3’-OH端连续性:密码子之间无间隔——若丢失或插入1个碱基,会移码突变不重叠:少数E coli的密码子例外简并性:多种密码子编码同一种氨基酸 (Table 11-1)?WHY?变偶性\摆动性:密码子的第3个碱基与反密码子配对时专一性较小??通用性:有个别例外 (e.g. 人的线粒体mRNA密码子与通用的有所不同) (Table 11-2、11-3)特殊密码子:起始密码子:AUG、GUG (仅限于某些低等生物)终止密码子:不编码任何氨基酸
第三节 核糖体一、结构组成(已讲)二、形成过程(略讲)三、功能与mRNA结合:(小亚基)Amino acyl site:与氨基酰-tRNA结合Peptidyl site:与肽基- tRNA结合肽基转移酶活性:催化肽键形成与辅助蛋白结合:(起始因子、延长因子和终止因子)
第四节 蛋白质合成一、肽链延长方向:N?C二、氨基酸的活化 1. 活化:aa. + ATP + E ? aa-AMP-E + ppi ?aa活化需要能量! 2. 氨酰-tRNA合成: aa-AMP-E + tRNA? aa-tRNA + AMP + E对于原核生物:Met-tRNAf N10-甲酰FH4 fMet-tRNAfNBaa.接到什么样的tRNA上去?——由氨酰-tRNA合成酶决定aa.接到肽链的什么地方去?——由codon-anticodon决定
第四节 蛋白质合成三、蛋白质多肽链的合成1. 起始密码子识别:AUG (少数为GUG)真核生物中,起始与中间的AUG均代表Met原核生物中,起始AUG代表fMet(甲酰甲硫氨酸),中间的AUG代表Met 2. 合成过程起始(initiation)肽链延伸(elongation):进位、转肽、移位终止与释放(termination release):
核糖体(c) tRNA脱离tRNA(b)肽键生成 (d)移位作用(a)起始复合物的形成tRNAmRNA蛋白质多肽链的合成
第四节 蛋白质合成三、蛋白质多肽链的合成2. 合成过程1. 起始:有三个起始因子参与,分别为IF1、IF2 、IF330S-IF3 - mRNA (IF3阻止30S与50S亚基结合)30S-IF1-IF2-GTP-fMet-tRNAf –mRNA?再与50S结合成为70S的核糖体70S- fMet-tRNAf-mRNA 这时, fMet-tRNAf 占据核糖体的P位,空着的A位准备接受下一个 aa-tRNAf 。
第四节 蛋白质合成三、蛋白质多肽链的合成2. 合成过程2. 肽链延伸: (有三个延长因子EF-Tu、EF-Ts、EF-G起作用)进位:aa-tRNA进入A位 (NB tRNA的反密码子与mRNA的Codon配对) 需要能量:GTP转肽:即肽链形成。在肽酰转移酶作用下,P位上的fMet-tRNAf的羧基 活化,与A位上的NH2形成(第1个)肽键。--P位空出移位:在GTP和移位酶(EF-G)G蛋白因子共同作用下,肽链从A位移到 P位(1个密码子的距离)。--A位空出不断重复进行以上三个步骤,肽链不断延长。
第四节 蛋白质合成三、蛋白质多肽链的合成2. 合成过程3. 终止与释放: RF1:识别UAA、UAG 三种终止和释放因子起作用: RF2:识别UAA、UGA RF3:具GTP
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