表达载体课件.pptxVIP

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2023-08-29 发布于山东
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表达载体课件.pptx

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表达载体;原核表达载体：? 适用于在原核细胞中表达外源基因的载体。主要元件：强启动子 SD顺序筛选标志其它调控基因 ;; 一融合型表达载体;技术关键：克隆基因插入原核序列3’端而维持正确阅读框架。选择合适酶切位点加人工合成的DNA接头构建位相载体;----ATG ---- AAC CTG GAA TTC CTA GGT --- ----TAC -----TTG GAC CTT AAG GAT CCA--- ;位相载体----含有3种读码框的系列载体;优点：表达效率高产物稳定易鉴定：融合蛋白分子量大，电泳可鉴定易纯化：利用融合原核多肽的特性 ;Ptac：IPTG诱导 GST融合蛋白—直接纯化产物切割方便： pGEX-1?T—凝血酶 pGEX-2T---凝血酶 pGEX-3T---X因子位相载体; 二非融合型表达载体 ;主要元件：强启动子 SD： ATG：第一个密码子 ;非融合型表达载体----pPL-Lamda;三分泌型表达载体：（一）主要元件：启动子和SD序列信号肽序列：SD下游，编码信号肽，可引导蛋白跨膜（二）优点：分泌表达，避免降解。 ;分泌型表达载体----pINIII-ompA1;分泌型融合表达载体----pEZZ18