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丽春红 S 染色液 丽春红（Ponceau S）也称猩红，可以用于 PVDF 膜、硝酸纤维素膜 （ nitrocellulose membrane ） 和醋酸纤维素膜（ cellulose acetate membrane）上的蛋白的检测。丽春红带负电荷，可以与带正电荷的氨基酸残基结合，同时丽春红也可以与蛋白的非极性区相结合，从而形成红色的条带。丽春红染色的灵敏度不及考马斯亮蓝染色。 丽春红对蛋白的染色是可逆的，染色后可以用蒸馏水，PBS 或其它适当溶液洗去。因此，蛋白质N 端测序时将SDS胶上的蛋白转移到PVDF 膜，用丽春红染色后将目的条带切下用于测序。 注意：丽春红染色液不适用于尼龙膜上的蛋白的检测。使用说明 将PVDF 膜、硝酸纤维素膜或醋酸纤维素膜浸没在丽春红染色液中， 摇动 5-10 分钟或更长时间；取出印迹膜，用蒸馏水，PBS 或其它适当溶液漂洗 2-3 次，可出现清晰条带，记录结果；用蒸馏水，PBS 或其它适当溶液漂洗 2-3 次，每次3-5 分钟，去除丽春红，进行后续的WB 检测。 补充：丽春红染色液也可以直接用来染PAGE 胶，不过，在染色之前最好用甲醇-乙酸溶液浸泡一下PAGE 胶，起到固定蛋白的作用。 丽春红染色液的配制： 常用的丽春红染色液有两种：一种用乙酸配制，另外一种用三氯乙酸 （TVA）和 5-磺基水杨酸（5-Sulfosalicylic acid）配制。配制方法如下： 一、用乙酸配制成分：0.1%（w/v）丽春红，5%（v/v）乙酸，ddH2O。 4 ℃保存，不要冻上。也可以配成“0.2%（w/v）丽春红，3%（v/v） 乙酸，ddH2O”。 二、用三氯乙酸和 5-磺基水杨酸成分：2% （w/v）丽春红，30%的三氯乙酸，30%的 5-磺基水杨酸。