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乳腺癌组织中and-7microrna的表达状况 近年来，发现了具有多基因调节功能的非编码小型脑浆肉，这在肿瘤的产生和发展中发挥了重要作用。乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤,相关microRNA的研究是当前的热点,现已取得更多新的进展。这些进展对于我们重新认识乳腺癌致病机制,诊断和靶向治疗乳腺癌都有重要启示。本研究以miR-let-7为靶基因,采用地高辛(Dig)配基标记探针的非同位素原位杂交技术,建立一种快速检测miR-let-7的方法,对乳腺癌组织进行检测,为以后探讨miR-let-7表达水平与乳腺癌发生的关系以及研究乳腺癌转移、复发和患者的预后打下实验基础。 1 材料和方法 1.1 断分型、分期及组织学分级依据 取自我院手术切除女性乳腺癌标本35例。乳腺癌诊断分型、分期及组织学分级按照《恶性肿瘤诊治规范》标准进行。标本均经10%甲醛固定,石蜡包埋,5 um厚连续切片,放置在多聚赖氨酸包被的载玻片上。 1.2 仪器 恒温箱(意大利JOUAN公司),正立荧光显微镜(Axio imager A1,德国ZEISS公司),摇床(常州澳华仪器有限公司) 1.3 抗地高辛抗体 Let-7探针为Exiqon公司产品,3’末端标记试剂盒、抗地高辛抗体、NBT/BCIP为Roche公司产品,蛋白酶K为Merck公司产品,甘氨酸、绵羊血清、牛血清白蛋白、三乙醇胺、甲酰胺、乙酸酐和Tween-20均购