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hplc技术在食品安全中的应用 1 食品安全检测 高效液相色谱法（hplc）是一项发展趋势良好的检测技术，尤其是对食品安全指数的快速检测，尤其是出色的。它融合了液相和气相两种色谱分析方法的优势,因而功效更明显,正在越来越广泛的在食品检测工作中应用开来。 2 色谱柱的选择 高效液相色谱仪型号很多,但主要部件和结构系统相同。高效液相色谱仪装置示意图如图1所示。 高压输液泵在高效液相色谱中,由于采用了颗粒直径很小的色谱柱填充剂,要使淋洗液以一定的流速流过色谱柱,必需使用高压泵。一般压力14为710~24 517 kPa,要求压力均匀、流量稳定。 梯度淋洗(梯度洗脱)梯度淋洗就是将两种或两种以上不同极性溶剂,在分离过程中按一定的比例匹配混合,以连续改变淋洗液的极性,通过载液中极性的变化来改变被分离组分的分离因素,以提高分离效果。 色谱柱高效液相色谱法所用的色谱柱一般采用内壁抛光的优质不锈钢,压力低于6 865 kPa,也可用厚壁玻璃或石英管,柱长500 mm,内径2 mm为好,采用直形柱,便于填充均匀。 检测器高效液相色谱法中的检测器主要用来监视经色谱柱分离后的组分随淋洗液流出的浓度变化,所描记的图形用于进行定性和定量分析,因此,要求检测器应该具有灵敏度高、重复性好、线性范围宽、适应范围广、对流量和温度的变化不敏感等特性。检测器按性质可分为2大类:一种是测量被分离物质本身浓度变化的检测器,如紫外检测器、传送丝氢焰检测器、电导检测器等;另一种是在高效液相色谱中没有通用检测器,实际应用时,按需要和结合各种检测器的特点进行选择应用。目前最广泛应用的是紫外检测器(UV)和差示析光检测器(RI)。 3 流动相分离分离 高效液相色谱法是在高压条件下溶质在固定相和流动相之间进行的一种连续多次交换过程,它借溶质在两相间分配系数、亲和力、吸附力或分子大小不同引起排阻作用的差别使不同溶质得以分离。 4 高效的检测分析方法 HPLC法适宜于分离分析高沸点、热不稳定性、分子量比较大的物质,因而已广泛应用于核酸、稠环芳烃、高聚物、药物的分析。近年HPLC也不断引入食品中对有毒害有害成分的分析,明显提高了分析速度和灵敏度。HPLC比液相柱层析法和气相色谱法先进,因而完全可以大范围的在食品快速检测中应用开来。笔者试述了几种常用的应用技术分析方案,供同行们学习交流。 4.1 其他理化检验方法。在接 高效液相色谱法应用于食品分析中自80年代就已经有过试验了,如国家标准《食品卫生检验方法理化部分》GB/T5009-1996中就有关于HPLC法的相关说明。 4.1.1 低分子糖固定剂利用hplc技术进行测定 牛奶以及各种奶制品富含糖、脂、蛋白质、维生素等营养以及强化的营养物质,应用HPLC技术可以很好的检测奶制品所含的各种营养成分及其含量,如在低分子糖类的测定中通常采取氨基键合柱、糖类分析专用柱进行分离,或者采取低成本非特定色谱柱测定低分子糖这一方式。 4.1.2 n-亚麻的提取 腌腊肉制品通常含有一定量的硝酸盐以及亚硝酸盐,这些添加剂往往作为发色剂来使用,而这些物质如果使用量超过规定要求或者在与肉品的相互作用下容易生成N-亚硝胺。这是一种有毒的物质,极容易引发食用者患上肝癌、结肠癌等等。以往我们在使用气相色谱法耗时长,而使用先进的高效液相色谱法仅仅需要13 min左右。 N-亚硝胺的测定腌腊肉品中常添加硝酸盐或亚硝酸盐作发色剂用,由于添加量过大或自身的还原作用在肉品中生成N-亚硝胺。N-亚硝胺可诱发肝癌、结肠癌等。某些N-亚硝胺化合物,如N-亚硝基二甲胺、N-亚硝基二乙胺、N-亚硝基四氢吡咯等也是一类致癌物质。过去采用气相色谱法测定食物中挥发性亚硝胺,其中仅色谱测定一步便需耗时1 h之多,而采用高效液相色谱法则只需要13 min。 4.1.3 提高食品检测质量 HPLC可以有效检测各种食品,包括蔬果、熟食制品、方便食品等等的营养成分及含量、食品添加剂、农药残留以及是否含有有毒性物质、违禁物质等情况,真正做到让食品检测质量过硬,让消费者放心。 4.2 食品添加剂的使用 如今翻翻各种方便的食品的外包装,每每会在食品成分处发现一长串的叫不出来名字的物质,各种各样的食品添加剂能够大大提高原有食品所含成分的质量以及营养价值,改善食品外观,延长食品保藏期,减少腐坏变质问题等等。据初步统计,我国目前有食品添加剂达20个大类,将近1 000个细分品种。对食品添加剂我们应该客观看待,不是所有的添加剂都是有害人类的健康的,举个例子来说,过去我们的豆腐主要添加剂就是卤水,而且这种物质是有毒的,但是因为我们的用量很小,而且豆腐的凝固环节这种物质在当时是必须的,且我国已经使用了上千年,因而我们不能说添加剂是完全应该禁止的。另外,我们还可以对一些营养成分不足的食品添加必要的所缺乏的营养成分,如在