真核生物DNA的复制完整版.pptxVIP

真核生物DNA的复制 ?与原核生物DNA复制的相同之处：1. 都是半保留、半不连续复制 2. 引发、延伸、终止3. 都必须有SSB和DNA聚合酶等的参与 1.真核生物DNA的复制特点（1）真核生物每条染色体上可以有多处复制起始点，原核生物只能有一个起始点。（2）复制子的大小是不均一的，从 13~900Kb不等。复制原点也不是同时启动的，复制子的复制要由引物转录触发;（3）真核生物的染色体在全部复制完成之前，各个起始点上的DNA复制不能再开始;而在快速生长的原核生物中，复制起始点上可以连续开始新的DNA复制,表现为一个复制子上可以有多个复制叉存在。（4）真核生物复制原点的DNA序列一般并无固定的模式，但大多包含一个富含A-T的序列和一个特异蛋白质的结合位点。 2+,， ，2.真核生物DNA聚合酶?合成时均以四种脱氧核糖核苷三磷酸为底物?需Mg 激活?模板和引物3 -OH存在 ?链的延伸方向为5 -3 。 真核生物的DNA聚合酶从哺乳动物细胞中分离出5种DNA聚合酶：DNA-pol a 引物合成，pola/引发酶，具有引物合成和延伸链的双重功能。DNA-pol β DNA损伤修复，没有其他pol时才起作用DNA-pol γ 催化线粒体DNA的复制DNA-pol δ复制中延长前导链和后随链具有高度前进动力(RF-C和PCNA)DNA-polε校读、修复和填补缺口，主要与后随链合成有关。 DNA聚合酶)α(Ⅰ)DNA聚合酶β(ⅣDNA聚合酶γ(M)DNA聚合酶δ(Ⅲ)DNA聚合酶ε(Ⅱ)定位细胞核细胞核线粒体细胞核细胞核亚基数目41221外切酶活性无无3′→5′外切酶3′→5′外切酶3′→5′外切酶引物合成酶活性有无无无无持续合成能力中等低高有PCNA时高高生物学功能引物合成修复线粒体DNA合成核DNA合成修复，后随链的合成 DNA复制的回环模型真核生物冈崎片段RNA引物的去除：由一种可特异性切除DNA-RNA杂合底物的RNAaseH1发挥核酸内切酶的活性，在靠近RNA与DNA的连接处切开引物，由具备5’-3’外切酶活性的MF1蛋白降解RNA片段。DNA连接酶I特异性的用于封闭冈崎片段之间的缺口。 3.真核生物DNA端粒的复制?原 核 生 物 的 染 色 体 是 环 状 的 ， 其 5′ 最 末 端 冈 崎 片 段 的RNA 引 物 去 除 后 ， 可 用 另 半 圈 DNA 链 作 为 引 物 向 前 延 伸 填 补空隙。?真 核 生 物 是 线 性 DNA ， 其 末 端 RNA 引 物 被 切 除 后 ， 没 有 可用 做 引 物 的 3′-OH 末 端 ， 空 缺 如 果 不 能 填 补 ， 从 而 会 使 5′末端序列因此而缩短。?真核生物通过形成端粒结构来解决这个问题。 telomere replication 端粒复制Figure 13.24. Two of the reasons why linear DNA molecules could become shorter after DNA replication(Genomes, 2 ed,Brown) (Genomes, 2 ed, Fig 12-23, Brown) ?端 粒 真 核 生 物 染 色 体 的 两 个 末 端 序 列 ， 一 段 简 单 的 串 联 重 复 序 列 组 成 ， 几 百 到 几 千 个 bp 。 生 物 学 功 能 是 保 持 染 色 体 末 端 结 构 的 稳 定 ， 防 止 染 色 体 间 末 端 连 接 ， 并 可 补 偿 后 随 链 5′ 端 去 除 RNA 引 物 后 造 成 的 空 缺 ， 防 止 染 色 体 复 制 时 末 端 丢 失 ， 决 定 细 胞 寿 命 ， 固 定 染 色 体 的 位 置。?端 粒 酶 一 种 含 RNA 的 蛋 白 质 复 合 体 ， 所 含 RNA 链 约 长 150 nt ， 并 约 含 1 ～5 个 拷 贝 的 CyAx 重 复 序 列 ， 是 合 成 端 粒 TxGy 股 的 模 板 。 端 粒 酶 实 际 是 一 种 逆 转 录 酶 ， 它 催 化 互 补 于 RNA 模板的DNA片段的合成。 (Genomes, 2 ed, Fig 12-24, Brown)Figure 13.25. Extension of the end of a humanchromosome by telomerase. The 3 end ofa human chromosomal DNA molecule isshown. The sequence comprises repeats ofthe human telomere motif 5-TTAGGG-3.The telomerase RNA bas