丛枝菌根真菌对烟苗生长、营养状况和生理活性的影响.docxVIP

丛枝菌根真菌对烟苗生长、营养状况和生理活性的影响 优良的多分枝细菌根菌（尤其是磷）可以促进寄生植物的生长，改善植物的营养状况（尤其是磷），改善植物的抗逆性，提高移植成活率。因此，该菌根生物技术在可持续农业生产中具有广阔的应用前景。AM真菌目前尚不能离体培养, 田间接种菌剂用量大, 工作繁重, 所以, AM真菌的田间应用主要以移栽菌根苗为主。烤烟漂浮育苗是将种子直播于装有基质的浮盘中, 漂浮于营养液上的一种育苗技术。目前, 我国每年推广烤烟漂浮育苗75万hm2, 占育苗总量的74%以上。将菌根技术与烤烟漂浮育苗结合, 生产菌根烟苗, 移栽大田后可使AM真菌在与土著真菌竞争的过程中处于优势地位, 充分发挥菌根效应。但AM真菌的种间, 菌株间甚至不同生态型的菌根效应存在显著差异, 在烤烟漂浮育苗条件下, 接种AM真菌能否产生菌根效应, 改善烟苗营养状况 (特别是磷) 、生理状况和促进生长稀见报道。试验选择了4株AM真菌, 于播种期接种烟苗, 在烟苗成苗期测定其真菌侵染、生物量, 植株营养状况和生理活性, 以筛选出适宜菌株, 探索AM真菌促进烤烟生长, 提高烟苗素质的机理。 1 材料和方法 1.1 菌株和培养基 AM真菌4株, 即根内球囊霉2株 (Glomus intraradicesSmithSchenck, BEG Number141, 193, 简称BEG-141和BEG-193) 、摩西球囊霉1株 (Glomuse mosseaeGerdemannTrappe, BEG Number167, 简称BEG-167) 和幼套球囊霉1株 (Glomuse etunicatumBeckerGerdemann, BEG Number168, 简称BEG-168) , 均由中国农业大学李晓林教授提供。AM真菌接种物是盆栽扩繁后, 含培养基质、孢子、菌丝和侵染根段的混合物。烤烟品种为K326, 由贵州省遵义烟草分公司提供。烤烟漂浮育苗专用基质 (总空隙度85%, 电导率700μs/cm, pH6.2, 有机质49.1%, 有效氮594.7mg/kg, 速效磷25.6mg/kg, 速效钾571.3mg/kg) 由重庆市武隆烟草分公司提供。 1.2 种子处理和养分营养液制备 播种时分别接种供试菌株 (BEG-141, BEG-167, BEG-168, BEG-193) , 以不接种为对照, 共5个处理。每个处理种植烟苗96株, 重复3次。 试验时, 将基质灭菌 (121℃, 1h) , 加无菌水润湿后, 装入浮盘孔隙内, 每穴6g;再将0.5g接种物埋入3～5mm深的基质中, 形成接种处理, 对照为埋入等量灭活接种物。每穴播种3粒烤烟种子, 出苗后留1株。在水池中漂浮培养, 营养液为稀释后的Hoagland营养液, 营养液中氮、磷、钾浓度分别为52.5mg/L、3.2mg/L和58.5mg/L, 其他大量元素为正常浓度的1/4, 微量元素的浓度不变。试验在人工控制温度、光照和湿度的培养室中进行。培养期间的光照强度14000～15000lx, 每日光照13h, 昼夜温度31～20℃, 湿度60%～80%。 1.3 不同处理对烟苗根系增强的影响 从出苗第10d开始, 每隔5d每处理取5株烟苗称取植株鲜重, 然后剪下根系, 经0.01%酸性品红乳酸甘油染色液染色后, 在普通光学显微镜下观察真菌结构, 并估算侵染率。在成苗期 (出苗后55d) , 每处理取15株烟苗, 用自来水和去离子水依次清洗;随机切取不同部位的鲜根0.5g, 切成0.5cm根段, 用根段频率标准法测定根系侵染率。剩余样品105℃杀青30min, 于70℃烘干至恒重后粉碎样品, H2SO4-H2O2消化, 分别用蒸馏法、钒钼黄比色法和火焰光度法测定植株的N、P、K含量。每处理另取15株烟苗, 用80%丙酮提取, 比色法测定叶绿素含量, NBT比色法测定叶片超氧化物歧化酶 (SOD) 活性, 磺胺比色法测定根系硝酸还原酶 (NR) 活性, N-乙酰氨基葡萄糖比色法测定根系几丁质酶活性。试验数据统计分析采用Excel 2000和SPSS 11.5进行。 2 结果与分析 2.1 出苗生长“控制点” 由图1可见, 各处理烟苗生物量增长的趋势基本一致, 出苗后45d前, 各处理烟苗生物量增长缓慢, 出苗45 d后, 生长出现“拐点”, 叶面积迅速扩大, 茎的生长明显加快, 植物生物量迅速增加。其中, 接种BEG-141, BEG-167和BEG-168的处理烟苗生长“拐点”出现在出苗后第45d;而接种BEG-193和对照的生长“拐点”出现较晚, 约在出苗后第50天。 2.2 苗期真菌初始感染情况 通过对根系侵染率的连续观察, 接种BEG-141和BEG-167后, 烟苗出苗后第20d可观察