二代测序文库制备酶分析.docxVIP

T4DNAPolymerase,即T4DNA聚合酶，是一种模板依赖的DNA聚合酶，可以在结合有引物的单链DNA模板上，从5—3方向催化DNA合成反应。T4DNAPolymerase具有3—5外切酶活性，但不具有5-3外切酶活性。 特点:T4DNAPolymerase由于同时具有5—3DNA聚合酶活性和3—5DNA外切酶活性，可以用于将5端突出末端补平或3端突出末端削平。T4DNAPolymerase的3—5DNA外切酶活性对于单链DNA要比双链DNA活性更高，即单链DNA要比双链DNA中的非配对链部分更容易被T4DNAPolymerase所消化。T4DNAPolymerase的3—5外切酶活性比KlenowFragment要高约200倍。 用途：T4DNAPolymerase可用于催化以下反应：DNA5或3突出末端的平滑化；通过置换反应进行标记DNA探针合成；定点突变过程中第二链的合成；不依赖于连接反应的PCR产物克隆。 来源：本T4DNALigase由大肠杆菌表达，表达基因的来源为T4嗜菌体。 活性定义：37°C30分钟时间内，催化10nmol脱氧核糖核苷酸(dNTPs)搀入到多聚核苷酸中所需的酶量定义为1个活性单位。 活性检测条件：67mMTris-HCl(pH8.8)，6.7mMMgCl，1mMDTT，16.7mM(NH\SO，0.2mg/mlBSA，0.033mMofeac