构建抗CD90抗体偶联去细胞猪主动脉瓣膜的实验研究的中期报告.docxVIP

构建抗CD90抗体偶联去细胞猪主动脉瓣膜的实验研究的中期报告 一、研究目的 随着人口老龄化加剧和心脏疾病患者增多，猪主动脉瓣膜逐渐成为人工修复心脏疾病的常见选择。然而，猪主动脉瓣膜移植存在一定的免疫排斥问题。因此，本实验旨在构建抗CD90抗体偶联去细胞猪主动脉瓣膜，探究其对免疫排斥的影响。 二、实验方法 1.猪主动脉瓣膜的提取 谷氨酸和丙氨酸液/肌酸液（DPBS）先冲洗掉猪心脏中的血液，然后将BSA缓冲液和逐步增大的EDTA浓度液交替地灌入猪主动脉瓣膜的两个侧面，使其自然展平。将灌注液小心地从瓣膜的两侧插入，并使其缓慢地进入瓣膜的精细缝合处，直至瓣膜成功展平。对灌注结果进行评估，并根据结果选择适当的EDTA浓度。使用剪切工具剪除瓣膜根部，除去压力假膜并冲洗瓣膜。 2.抗CD90抗体的偶联 使用化学交联试剂将抗CD90抗体与瓣膜交联，使其抗原抗体复合物固定在瓣膜表面。将偶联的瓣膜放置在慢速振荡器中，在最大振荡速度下振荡7至8小时，以增加复合物的表面积。 3.瓣膜移植 将偶联的瓣膜移植至接受者。首先进行免疫抑制治疗，包括糖皮质激素和环孢霉素的使用。瓣膜移植后，监测接受者的体温、血糖、血压、心率和血常规等指标变化。定期进行免疫功能检查。 三、实验预期结果 1.抗CD90抗体偶联的去细胞主动脉瓣膜可以成功构建。 2.移植偶联的瓣膜后，接受者免疫系统的排斥反应将得到一定程度的抑制。 3.实验结果有望为建立有效的去细胞猪主动脉瓣膜移植技术提供基础理论和实验依据。