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co-对马铃薯品种费乌瑞甘薯幼苗期表型变异的影响 飞兆是国家农业科学院从荷兰进口的新鲜食品、早、高产、优质的甘薯品种。生长期为65.75天，平均商品甘薯率为85%。由于该品种结薯集中、薯型美观、薯肉鲜美、食用品质好,深受生产者和消费者喜爱。但该品种易感青枯病、环腐病和晚疫病,如果能在保持品种特性的基础上进行改良,提高其抗性,能显著提高其产量和商品价值。 突变体对于种质创新和品种选育具有重要意义,60Co-γ辐射能够诱发基因发生突变,突变的频率比自然突变提高100~1000倍[2~3],在短时间内创造新的基因资源。据2008年不完全统计,我国辐射诱变育成新品种623个,占全世界辐射育成新品种总和(2320个)的26.9%,每年为国家创造经济效益33~40亿元。由于马铃薯是同源四倍体无性繁殖作物,用传统育种方法进行品种改良存在诸多局限,辐射处理马铃薯诱发产生突变,获得的有益突变可用无性繁殖的方法固定下来,能够加快品种选育的进程。据报道,60Co-γ射线诱变已在改良马铃薯抗病、耐热、耐盐、增产及品质等性状方面获得有效应用。因此,利用60Co-γ辐射诱变对马铃薯进行品种改良是一种有效的育种手段。 60Co-γ辐照处理对马铃薯辐射当代(VM1)的表型性状会产生显著影响,有些由基因型引起的表型变异是可以遗传的,而非基因型的变异是不能遗传的。不同60Co-γ射线辐照处理对马铃薯VM1主要性状影响效应的研究报道较少。VM1表型变异效应的研究,对辐射后代有益变异的表型筛选和从分子水平上进行变异选择均有重要的参考价值。本研究利用不同辐照剂量的60Co-γ射线对费乌瑞它微型薯进行诱变处理,对诱变后的出苗率、畸变率、株高、叶片数、茎粗、结薯等形态指标的表型变异进行观测分析,为下一步进行DNA变异的检测、有益变异类型的筛选和诱变辐射育种提供参考。 1 材料和方法 1.1 瑞它试苗增殖后分对于小薯支持苗的增殖培养 中国农业科学院蔬菜花卉研究所提供的费乌瑞它试管苗增殖数代后,盆栽所结微型薯。微型薯储存于避光室温条件下自然萌动出芽,待芽长约0.5~1.0cm时进行辐射处理。 1.2 方法 1.2.1 辐射处理系统 2009年12月24日在贵州金农辐照科技有限责任公司进行辐射处理。试验设置6个处理,辐照剂量分别为0(CK)、10、20、40、60、80Gy,每个处理14粒微型薯,分别装入网袋内进行辐射处理。 1.2.2 栽培时的植株测定 2009年12月25日将CK和处理后的微型薯栽入培养钵(培养钵为上口直径15cm,底部直径11cm,高14cm的塑料钵;基质为透性好,栽培后只需浇灌清水的营养土),每钵1粒,置于贵州省农业科学院重点实验室大棚中、在自然光照及10~15℃条件下栽培。每隔30d观测记载1次植株的出苗、叶形、株型、株高、叶片数、茎粗等。植株成熟后(叶黄茎枯)收获,对单株结薯数、单株薯重以及结薯率进行统计。 1.2.3 计算公共格式 出苗率(%)=出苗薯数/播种薯数×100 畸变率(%)=畸变总株数/辐射处理总株数×100 结薯率(%)=结薯株数/总株数×100 1.3 处理数据 试验数据基于MicrosoftExcel 2010处理,数据统计分析软件为PASW Statistics 18。 2 结果与分析 2.1 辐照对微型薯出苗的影响 各辐射处理的出苗期(从播种到出苗)与CK相比,均出现不同程度的延缓。以薯块出苗率达到100%时的出苗时间观察表明,CK约为15d、10Gy处理44d、20Gy处理62d、40Gy处理68d、60Gy处理73d、80Gy处理82d,表明60Co-γ辐射严重延缓微型薯的出苗时间,延缓时间随辐照剂量的增加而加长。而对生育期(出苗到成熟)影响不大。播种后30和60d调查结果表明,辐射处理薯块出苗率随辐照剂量的加大呈梯度下降,出苗率与辐照剂量之间呈极显著负相关,相关系数分别为-0.970和-0.922(表1)。播种后90d调查,各处理的薯块出苗率均为100%。 2.2 辐照对植株生长和变异性状的影响 60Co-γ辐射后植株性状出现不同程度的变异,尤其是叶片比较突出(图示),有的植株同时呈现多种变异类型,如图1-a,叶片同时出现叶脉淡化和不对称现象;图1-f的植株同时兼有叶片丛生和茎上结薯等。变异性状主要表现有:叶片不对称(35株)、叶片融合(23株)、叶片丛生(20株)、叶脉淡化(7株)、叶片完全变形(2株),茎上结薯(1株),其中叶片融合和不对称在各处理均有出现,80Gy60Co-γ处理后有2株出现叶片完全变形。相关性分析表明,畸变率与辐照剂量之间存在显著正相关,相关系数为0.884,辐射后叶形及株形畸变率为76.1%(表2)。随着辐照剂量的增加植株畸变率和畸变类型也逐渐增多,80Gy处理的植株畸变率达到100%(表2)