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人类巴氏小体的观察 遗传学实验报告 题目:人体巴氏体观察 名称:学生人数:班级:时间： 1,实验目的： 1。掌握人类性染色质的检测方法； 2。观察人类性染色质的形态特征和存在位置，为进一步研究人类染色体 畸变和疾病提供参考条件。 3。了解雌性哺乳动物X染色体失活的假说和剂量补偿效应的机制第二，实验原理： 人有23对染色体，其中22对是常染色体，另一对是性染色体。XX代表女性，XY代表男性。一些X和Y染色体是同源的，可以在减数分裂过程中配对，而其余的则是不同的起源。Y染色体包含很少的基因，而X染色体包含大量的基因。男性和女性有相同数量的常染色体，并且包含相同数量的基因。然而，女性有两条X染色体，而男性有一条X染色体和一条Y染色体，因此女性性染色体携带的基因剂量比男性高得多。然而，研究发现女性性相关基因的表达量与男性大致相同。这是什么原因？ 剂量补偿效应（剂量补偿效应）定义:在具有XY性别决定机制的生物体中，性连锁基因在雌性和雄性中具有相等或接近相等的有效剂量遗传效应也就是说，在雌性和雄性细胞中，x染色体基因编码的酶或其他蛋白质产物在数量上相等或接近相等剂量补偿有两种情况。雌性哺乳动物的一条X染色体异染色质化（失活），并且只有一条X染色体是活性的，这使得基因产物的剂量平衡，尽管雄性和雌性动物的X染色体数量不同。二是X染色质的转录率不同。如果两个X染色体在苍蝇的雌性细胞中都是活跃的，它们的转录率就低于雄性细胞。 IM.L.Barr等人在雌性猫神经元的核膜中发现了浓缩的深染体，但在雄性个体细胞中没有发现。这个结构叫做巴尔体进一步的研究发现，这种结构可以在所有哺乳动物的雌性细胞中看到。巴氏小体是由雌性哺乳动物体细胞中的X染色质随机失活形成的。它们在间期细胞核中是异质的（染色质高度螺旋），并且是靠近核膜边缘的染色小体。 里昂假说1961，玛丽?里昂提出了一个假说，阐明哺乳动物的剂量补偿效应和形成巴氏小体的X染色体的失活 的主要内容包括： 雌性哺乳动物个体的两条X染色体之一在受精后失活； 两个X染色体中的哪一个随机失活;在同一哺乳动物的体细胞中，一些亲本X染色体失活，一些亲本X染色体失活。 失活发生在胚胎早期（人类胚胎发育的16天）。一旦细胞的X染色体失活，该细胞的所有子代细胞中的X染色体都处于失活状态。当生殖细胞形成时，失活的染色体可以恢复。 杂种雌性在性别连锁基因的功能上是嵌合体，即在一些细胞中来自亲本的性别连锁基因表达和在一些细胞中来自亲本的性别连锁基因表达。这两个细胞是随机嵌入的。 1 实验证据:1）玳瑁皮毛上的黑色和黄色带-XOXOXOO2）人葡萄糖-6-磷酸脱氢酶活性的测定GdA/GdB 图1取自G-6-帕金森氏症的电泳图谱，具有AB表型（0:克隆前培养，显示AB带；慢带只在克隆1、2、4、5、8、9中出现；答:快速波段显示在克隆3、6和7中。） X染色质的失活只是部分失活，一些基因仍然具有转录活性。目前，已知大约有十几个基因是活跃的。如果失活的X染色质完全失活，XXY型（克氏综合征）和XO型（特纳综合征）应该表现正常。 巴尔小体的数目=n-1（n为X染色体数目）正常女性间期细胞核中巴尔小体的数目为1；正常人间期核中的巴尔小体为0；XXX女性间期核中的巴尔小体为2；XXXX女性间期细胞核中的巴尔小体为3 常染色质:低折叠度，呈伸展状态，染色时呈浅色DNA主要是单序列和中等重复序列常染色质是基因转录的必要条件。 组成型异染色质:除复制期外，在着丝粒区、端粒、卫星等处呈浓缩状态。中期染色体。它显然在遗传上是惰性的，不转录或编码蛋白质，具有高度的异染色质折叠，并处于浓缩状态。 兼性异染色质:指原始常染色质的浓缩和某些细胞或发育的某一阶段基因转录活性的丧失受精后，失活的X染色质可被激活成常染色质。 巴氏小体的形态特征和定位 X染色质:X染色质的形态是密集排列的染色质小体；轮廓清晰；尺寸1~1.5“n?常附着在核膜的边缘或靠近内部；形状有凸形、三角形、椭圆形、短杆形和双球形等。正常女性口腔粘膜细胞的发生率为30-50%三、实验材料： 1。设备:显微镜、载玻片、盖玻片、镊子、牙签等。2.试剂:硫堇染料溶液、1M盐酸、蒸馏水和生理盐水3.材料:口腔上皮细胞或毛囊细胞 口腔上皮细胞相对较大，易于观察，但容易污染细菌和其他杂质。单个的毛囊细胞略小，观察起来有些困难。它的优点是不被细菌污染。 4。实验步骤： 1。取口腔上皮细胞或毛囊细胞，涂于干净的载玻片上，自然干燥5-10分钟；2.1M盐酸水解3-5分钟；3.用水冲洗3次，每次1分钟；4.将硫堇染色20min； 5。洗掉染料，用显微镜观察。 2 6。如果染色太深或有大量染料结晶，可用95%乙醇进行3-5秒的分色，用水洗涤除去酒精，并进行 显微镜检查 5。实验结果: X染色质鉴定方法:一般位于核膜内