脉冲电场对细胞膜电穿孔面积的影响研究.pdfVIP

2023 年 7 月 电 工 技 术 学 报 Vol.38 No. 14 第 38 卷第 14 期 TRANSACTIONS OF CHINA ELECTROTECHNICAL SOCIETY Jul. 2023 DOI: 10.19595/j.cnki.1000-6753.tces.220786 脉冲电场对细胞膜电穿孔面积的影响研究 1,2 1 1 1 1 吴 晓 米 彦 郑 伟 马 驰 张梦男 （1. 输配电装备及系统安全与新技术国家重点实验室（重庆大学） 重庆 400030 2. 国网河南省电力公司营销服务中心（计量中心） 郑州 450000 ） 摘要 目前在实验中通常采用间接的表征参量以衡量细胞电穿孔效应，为了能够在实验中找 到一种直接的表征参量，该文提出了电穿孔面积这一新的表征参量及其测量方法。基于分子传输 动力学，在脉冲电场下开展了荧光分子染色实验，然后通过对细胞荧光强度曲线进行数据处理， 计算出脉冲期间形成的电穿孔面积，并研究了不同脉冲电场参数下的细胞膜电穿孔面积变化规律。 结果表明，随着脉冲电场参数增强，细胞荧光强度增大，电穿孔效应增强，计算出的电穿孔面积 数值与已有结论吻合，证实了该实验方法的可行性。此外，电穿孔面积随着电场强度、脉冲宽度 和脉冲电冲击的增大而线性增大，为脉冲电场临床治疗提供了指导。 关键词：脉冲电场 电穿孔效应 电穿孔面积 分子传输 荧光染色实验 中图分类号：TM836 ；Q64 0 引言 胞活性随脉冲宽度呈现 S 型衰减；当固定电场强度 为 6 kV/cm 、脉冲宽度为 300 ns 时，细胞活性随脉 脉冲电场是一种有效治疗肿瘤的方法，其原理 冲个数呈现指数型衰减。T. Polajžer 等[5]通过 MTS 是细胞在电场的作用下，会在细胞膜内外侧感应出 （一种四唑盐类化合物）染色剂表征细胞的增殖和 电位，当跨膜电压超过某一阈值时，细胞膜会发生 击穿，即电穿孔[1-2] 。细胞发生电穿孔后，膜通透性 活性发现，随着电场强度的增大，细胞存活率下降， 并且与脉冲相间延迟有关，当相间延迟较大时，脉 增大，一些分子（如荧光分子、化学药物和 DNA 等） 冲电场在降低细胞存活率方面更有效。M. M. Sadik 可通过细胞膜进入细胞内。 等[6]通过荧光显微镜观察电场下荧光分子碘化丙啶 目前在实验中有许多表征电穿孔效应的参量， （Propidium Iodide, PI ）在细胞内的空间分布和时间 如细胞活性、细胞凋亡坏死率、细胞膜通透性、电 变化，实时反映了细胞对 PI 分子的摄取情况，发现 穿孔细胞百分比等。细胞活性通过检测细胞群体的 随着观测时间的增大，进入细胞内的 PI 分子增多， 健康情况以反映细胞的生理状态和代谢水平。细胞 细胞荧光强度增大。类似地，J. Dermol 等[7]检测了 膜通透性利用细胞对荧光分子染料的摄取情况，观 脉冲