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细胞衰老检测试剂盒 说明书修订日期： 2016.08.04 Cat Number：KGPAG001 Store at -20℃ for one year，protected from light For Research Use Only(科研专用) 一、 试剂盒说明 绝大多数正常细胞被认为仅有有限的分裂能力，在不能分裂后就进入衰老 (senescence)状态。此时细胞仍然是存活的，但细胞的基因和蛋白的表达谱发生了很大改变。衰老 (senescence)的细胞不能在一些常规的刺激下再诱导细胞分裂， 并且衰老细胞的细胞周期分布也比较特殊，不同于一些损伤诱导的细胞休眠，也不同于细胞生长接触抑制的情况。衰老 细胞细胞通常体积变大，表达 pH 6.0 时有高酶活性的β-半乳糖苷酶。细胞衰老也被认为是生物体抑制肿瘤的一种方式， 同时也是生物体老化(aging)的一种潜在原因。 细 胞 衰 老 β- 半 乳 糖 苷 酶 染 色 试 剂 盒 (Senescence β-Galactosidase Staining Kit) 是 一 种 基 于 衰 老 时SA-β-Gal(senescence-associated β-galactosidase) 活性水平上调而对衰老细胞或组织进行染色检测的试剂盒。在普通的光学显微镜下就可以观测到细胞或组织的衰老情况。本试剂盒可以用于培养细胞的衰老检测，也可以用于组织切片的衰 老检测。 本试剂盒仅染色衰老细胞，不会染色衰老前的细胞 (presenescent cells)、静止期细胞 (quiescent cells)、永生细胞(immortal cells)或肿瘤细胞。 KGPAG001 可以染色 1 块 96 孔板或 6 孔板 10 个孔；KGPAG001L 可以染色 10 块 96 孔板或 6 孔板 100 个孔。 二、 试剂盒组份 组 组 份 固定液 KGPAG001 100T 10 ml KGPAG001L 1000T 100 ml 保存条件 染色液 A 染色液 B X-gal 10 ml 500 ul 10 mg 100 ml 5 ml 10mg*10 支 2-8℃ 2-8℃ -20℃，避光 三、 操作步骤 准备细胞或组织样品片用 PBS 轻柔洗三遍。 每片 100ul 滴加固定液，室温固定 10min。 吸去固定液，PBS 轻柔洗三遍。 配制染色工作液（临用前，以 500μl 染色液 B 完全溶解 10mg 的 X-gal，再将其与染色液 A 充分混匀，2-8℃避光，现用现配），每片按用量滴加 100ul 左右染色液工作液， 37 度无 CO2温箱中避光反应 10 小时。 普通光学显微镜下观察，分别计数三个不同视野，计算蓝染的阳性细胞数。 四、 注意事项 1、X-gal 注意避光保存。 2、染色工作液现用现配。如不能一次用完，请分装保存。