第三章酶催化反应动力学.pptVIP

与对氨基苯甲酸竞争性抑制二氢叶酸合成酶 举例：磺胺类药物的抑菌机制 当前第30页\共有49页\编于星期三\8点 ②非竞争性抑制(noncompetitive inhibition) ： 非竞争性抑制剂(I)和底物(S)可以同时与酶(E)结合，两者之间不存在竞争关系。 但是在酶与抑制剂结合后，还可以进一步与底物结合形成酶-底物-抑制剂复合物ESI；酶与底物结合后，也可以进一步与抑制剂结合形成酶-底物-抑制剂复合物ESI。 这种中间的三元复合物，即酶-底物-抑制剂复合物ESI不能进一步分解产生产物，因此相应的酶促反应速度下降。 当前第31页\共有49页\编于星期三\8点 非竞争性抑制反应模式 在非竞争性抑制中，抑制剂(I)与酶(E)或酶-底物复合物(ES)以及底物(S)与酶-抑制剂复合物(EI)的结合都是可逆的，因此存在着如下的化学平衡式： + S － S + S － S + ESI EI E ES E P 当前第32页\共有49页\编于星期三\8点 图3-6 非竞争性抑制曲线 ⑴ Vm值降低，Km值不变；Vm随[I]的增加而降低； ⑵ 双倒数作图所得直线相交于横轴； ⑶ 抑制剂对酶与底物的结合无影响，故底物浓度的改变对抑制程度无影响；抑制程度取决于抑制剂的浓度。 特点： 当前第33页\共有49页\编于星期三\8点 这类抑制最典型的例子是亮氨酸是精氨酸酶的一种非竞争性抑制剂。 有某些重金属离子如Ag+、Cu2+、Hg2+、Pb2+等对酶的抑制作用也属于这一类。 EDTA对金属酶的抑制。 举例： 当前第34页\共有49页\编于星期三\8点 ③反竞争性抑制(uncompetitive inhibition) ： 这类抑制作用的特点是只有在酶(E)与底物(S)结合后，才能与抑制剂(I)结合，形成酶-底物-抑制剂复合物ESI，与非竞争性抑制相似，这种中间的三元复合物，即酶-底物-抑制剂复合物ESI不能进一步分解产生产物，因此相应的酶促反应速度下降。 当前第35页\共有49页\编于星期三\8点 反竞争性抑制反应模式 反竞争性抑制的特点是，酶(E)必须先与底物(S)结合，然后才与抑制剂(I)结合，即抑制剂(I)与酶-底物复合物(ES)的结合是可逆的，因此存在着如下的化学平衡式： + + E S ES ESI E P 当前第36页\共有49页\编于星期三\8点 图3-7 反竞争性抑制曲线 ⑴ Vm值和Km值都随[I]的增加而降低； ⑵ 双倒数作图所得为一组平行线； ⑶必须有底物存在，抑制剂才能对酶产生抑制作用；抑制程度随底物浓度的增加而增加。 特点： 当前第37页\共有49页\编于星期三\8点 举例： 这种抑制作用在单底物反应中比较少见，而常见于多底物反应中。 目前已经证明，肼类化合物对胃蛋白酶的抑制作用、氰化物对芳香硫酸酯酶的抑制作用、L-Phe和L-同型精氨酸等多种氨基酸对碱性磷酸酶的抑制作用都属于反竞争性抑制。 当前第38页\共有49页\编于星期三\8点 为了方便理解和记忆，我们现将无抑制剂和有抑制剂等不同情况下的米氏方程和Vmax及Km的变化总结归纳在表3-1中。 总结： 当前第39页\共有49页\编于星期三\8点 5 其它因素对酶促反应速度的影响 其它各种影响酶促反应速度的因素主要包括：温度、pH和激活剂等。 当前第40页\共有49页\编于星期三\8点 5.1温度对酶促反应速度的影响 温度对酶促反应的双重影响： 一、 当温度升高时，与一般化学反应一样，反应速度加快（Q10一般等于2）。 二、 温度升高随着温度逐渐升高，酶蛋白会因逐渐变性而失活）。 当前第41页\共有49页\编于星期三\8点 图3-9 温度对酶促反应速度的影响 酶在固体状态下比在溶液中对温度的耐受力更高。酶的冰冻干粉制剂通常在冰箱中可存放几个月以上，而酶溶液一般在冰箱中只能保存数周。所以酶制剂以固体保存为佳。 当前第42页\共有49页\编于星期三\8点 一般来说，动物细胞内的酶最适温度一般为35～40℃，植物细胞中的酶最适温度较动物细胞中稍高，通常在40～50℃之间，而微生物中的酶最适温度差别则较大，如用于进行PCR反应的Taq DNA聚合酶的最适温度可高达70℃。 当前第43页\共有49页\编于星期三\8点 5.2 pH对酶促反应速度的影响 通常在一定pH下，酶会表现出最大活力，而一旦高于或低于此pH，酶活力就会降低，我们把表现出酶最大活力时的pH称为该酶的最适pH。 在不同pH条件下进行某种酶促化学反应，然后将所测得的酶促反应速度相对于pH来作图，即可得到如图3-10所示的钟罩形曲线。 图3-10 pH对酶活力的影响 当前第44页\共有49页\编于星期三\8点 pH影响酶活力的原因可能包括以