LAMP技术对猪呼吸道主要病原诊断课件.pptxVIP

LAMP技猪呼吸道主要病原断的建立与用 1 学院：物科技学院年 2009 姓名：夏 研究意义 2 猪支原体性肺炎是由猪肺炎支原体引起的一种慢性肺炎，称作猪地方流行性肺炎， Mare、 Switzer和Goodwin等在1965年分从患肺炎猪的肺中分离出其病原，后成 功复制了本病，将此病原被命名 M.hyopneumoniae。到目前止，猪支原体性肺炎都被养猪人士看做是重要疫病之一，它可能会造成重大失，生次高，而 且病流行最广，是最防的。本病然 的很早，但是近年来是由于常生， 生的方式是与PRRS、病毒等其它病原引起猪的混合感染，并且养猪造成重大的 失。 研究意 猪染性胸膜肺炎是一种接触性呼吸道染病，是感染猪胸膜肺炎放杆菌而引起的。主要的床 特征包括急性出血性素性胸膜肺炎和慢性 素性坏死性胸膜肺炎。猪胸膜肺炎放杆菌 Actinobacilluspleuropneumoniae(App)的血清型在大概有12种，其中有一些毒力弱且不具有致病性，其他一些会引起重的疾病。 后毒力很强的是1、5、9、11和12型，而毒力温 和的是3、6型。胸膜肺炎放杆菌寄生在上呼吸道和扁桃体。病原的播途径主要是通沫或气 在短距离内播，胸膜肺炎放杆菌在体外只能存 活几天。 3 研究意 猪巴氏杆菌病（swine pasteurellosis）又被称作猪肺疫、猪出血性血症，俗称 “喉”，是一种因感染多性巴氏杆菌而引起的 染病，血症病急性型的主要特征， 床症状包括咽喉部出急性，病猪呼吸困；急性型的主要床特征是出素性胸膜肺炎；而慢性型的床症状并不明，一般表慢性 肺炎、关炎和胃炎等，而且病猪逐消瘦 ，国内的猪群主要是散性的感染。近些年来，我 国集化养猪展迅速，而猪群感染巴氏杆 菌的道也逐 增多。 4 研究意 在黑江地区的模化养猪，疾病控制一直是十分棘手的，特是猪的呼吸系疾病呈蔓延大，病率高，死亡率在 5% ～15%或以上，猪的各个日段均存在呼吸道疾病的危害。呼吸系疾病除直接造成死亡失外，因料酬大大降低，感染等而 造成治用升高，集化猪和养猪造 成重的 失。把LAMP技运用 猪病 行早期快速断和流行病学意重大。同模化猪的病情况行流行病学 ，根据黑江省模化猪制定有效的 合防病措施，减少因呼吸道疾病猪来的 失。 5 研究内容 猪呼吸道疾病的流行病学 猪呼吸道疾病的主要病原 LAMP方法的建立 LAMP方法的用及合防治措施的制定 6 猪呼吸道疾病的流行病学 采集的病例主要来自黑江省不同地区的 18个猪，每个猪采取了不同的病料数，并且了解了猪内猪只的病情况。 7 猪呼吸道疾病的流行病学 采用血清学和PCR分子生物学方法病原菌 8 猪呼吸道疾病流行病学 黑龙江省各地区猪场猪呼吸道疾病流行病学调查柱状图 9 猪呼吸道疾病流行病学 10 ，在黑江地区的养猪， 90％的猪都有猪的呼吸道合症的生，在黑江屠宰有有肺炎病的猪肺。猪爆猪呼吸道合症后很清除，它除了造成直接死亡之外，更重的是使猪增重慢，料利用率减少，出推，并 期携多种相关病原体。有些猪 PRDC的病率可达40%- 80%，直接死亡率在20%以上，增重下降或生停滞的可达 70%，有的猪甚至被迫将段的猪全部淘汰。很多呼吸道 合症的病原体所引的床症状极相似，很通床症状做出 正确的断。有些疾病（如猪耳病）已不能表出其床的特 异性症状，有些病原体有相当的潜伏期。因此更加以做出准 确的断。血清学断然能在一定程度上做出确，但， 以足需要。因此，研究出能同多种病原行断的方法在必行。同模化猪的病情况行流行病学，根据黑江省模化猪制定有效的合防病措施，减少因呼吸道疾病猪来的失。 猪呼吸道疾病的主要病原 LAMP方法的建立 11 引物设计与合成 实验方法 猪支原体、猪胸膜肺炎放杆菌、猪巴氏杆菌基因的提取 PCR扩增及鉴定 LAMP 断方法反条件的化 猪呼吸道疾病的主要病原 LAMP方法的建立 重粒的定果 M 1 2 3 4 5 6 7 2000bp 1000bp 750bp 500bp 250bp 100bp pMD18-T-Mh载体PCR鉴定结果 1-2：扩增Mh基因；3-4：扩增App基因；5：扩增Sp基因；6：阳性对照；7：阴性对照 1-5: The PCR identification result of the pMD18-T-Mh、pMD18-T-App、pMD18-T-Sp plasmid6: The positive control; 7: The negative control 12 猪呼吸道疾病的主要病原 LAMP方法的建立 LAMP 方法反条件的化 猪肺炎支原体内外引物的化 5：阳性对照6：阴性对照 2000bp 1000bp 750bp 500bp 250bp 100bp 2000bp 1000bp 750bp 500bp 2