光合细菌培养基.docxVIP

红螺菌培养基: 1、富集培养基： 经典的紫色非硫细菌（红螺菌）的富集培养基的配方为：NH4C1:0.1g；NaHCO3:0.1g；K2HPO4：0.02g；CH3COONa:0.1?0.5g；MgSO4-7H2O:0.02g；NaCl:0.05?0.2g；生长因子1ml,蒸馏水97ml，微量元素溶液1ml,pH为7.0。 其中，①5%NaHCO3水溶液，过滤除菌取2m1加入无菌培养基中。②生长因子：维生素B10.001mg、乙尼克丁酸0.1mg、对氨基苯甲酸0.1mg、生物素0.001mg,以上药品溶于蒸馏水中，定容至10ml，然后过滤除菌。③微量元素溶液：FeCl?6HO:5mg；CuS0?5HO:0.05mg；HBOlmg；324234MnCl?4HO:0.05mg；ZnSO?7HO:1mg；Co（NO）?6HO:0.5mg。以上药2242322品分别溶于蒸馏水中，并定容至1000m1。 除①、②、③外，各成分溶解后100Pa灭菌20min。然后分别加入①、②、③，如加入0.1%?0.3%的蛋白胨则能促进该菌生长。 2、分离培养基： 传统的红螺科分离培养基的配方为：NH4Cl:0.1g；MgCl2:0.02g；酵母膏：0.01g；K2HPO4：0.05g；NaCl:0.2g；琼脂2g，蒸馏水90ml。 100Pa灭菌20min。 灭菌后，无菌操作加入经过滤除菌的0.5g/5mlNaHCO3，再无菌加入过滤除菌的0.1g或0.1mlNa2S?9H2O（降低培养基的氧化还原值），最后再加入5ml经过滤除菌的乙醇、、戊醇或4%丙氨酸。用过滤灭菌的0.1mol/H3PO3调pH至7.0。 摘自百度知道。 筛选富集培养基为：NH4C11g/L,NaHCO31g/L,CH3COONa3g/L,KH2PO40.3g/L,MgSO40.1g/L,酵母膏0.5g/L,微量元素母液1g,自然pH值。扩大培养培养基以海水代替微量元素母液。1000?40001x光照，（30±2）°C恒温培养。 参考文献：固定化海洋光合细菌处理生活污水的研究*黄宝兴，李兰生，赵亮，张微，唐迎迎海洋湖沼通报 基础培养基:NH4C1:1g;Na2HPO4：0.5g;MgSO4:0.2g;NaCl:2g;NaHCO3:5g;酵母膏:2g;乙醇2ml，用0.1NH3PO4调至pH7.0。 划线培养基:采用固体琼脂培养基，即在基础培养基的基础上添加1.0%的琼脂。 以上培养基初始pH值均用H3PO4调至7.0，经121C灭菌30分钟，NaHCO3过滤除菌后加入。培养条件:光照培养箱温度控制在30C、光照强度控制在3000uE.m-2s-1培养。光合细菌是一种兼性嫌气细菌，需要深层培养或在真空干燥器内达到嫌气或半嫌气状态，一般将混合菌放入培养液中先富集再分离。具体方法:将混合菌装入10ml试管中，加入培养液充满至刻度，盖上胶塞，在光照条件下保持在30°C左右培养。待培养液出现红色后，取培养液加1.5%的琼脂，制成固体培养基，取菌液分别用无菌水以10-100000000倍稀释，分别取lml样本涂在平皿上，光照、30C培养2d左右在平板上长出菌落。移至平板采用划线法进行分离，将划好线的平板倒置，在相同条件下培养，反复分离纯化，挑取不同特征的菌落，用斜面保存，纯化分离后的菌种置于冰箱保存备用。 PSB培养中除碳、氮、磷等主要营养元素外，还需要一定量的镁、钙、钠和有关的微量元素，将所需的营养元素按一定的比例配成适于菌体生长繁殖的培养基。本实验室采用酵母膏、蛋白胨培养基，基本配方为CaCl20.3g，MgSO4?7H2O0.5g，酵母膏3g，蛋白胨3g，蒸馏水1000ml，pH:6.8,如需制固体培养基再加2%琼脂。培养温度：25C?30C最佳，光照强度：2000LX?5000LX，PH：7.5?8.5最佳。 把菌种接种到灭好菌的培养基中，在三角瓶中进行二级培养，每天摇晃几次。把40L的反应器中加满自来水，放入通气管，盖上保鲜膜一起用次氯酸杀菌消毒24小时，用硫代硫酸钠（1L次氯酸需要150g硫代硫酸钠）来中和。以15%的接种量接入反应器中，用泵通气培养，用分光光度计跟踪测量菌液的密度，得到菌液的密度较高，而且反应器还可以进一步放大。 参考文献：光合细菌的培养及应用魏玉利4,2.1,2细菌生长培养基 Og,酵母膏壬Og,iwm*0昏业沮0.2小KILITJ；。.海，天然海AlOOOil.,.火422,1光合细菌的培养IlOOmL旦塞容虽瓶中装有5而1光合细菌培养基，按1。祐接种星接种母渔［，约项个/*,混合均匀后aJ1U温光照培养箱中光照质氧培养.光强约250OLiix,温度30Co光合细菌的增殖培养及对有机磷农药的隆解 参考文献：,?*2-2HCH并.合细上节养隹13 试剂名称 含