口服盐酸安妥沙星400mg在肺叶切除术预防感染中的初步研究.docxVIP

口服盐酸安妥沙星400mg在肺叶切除术预防感染中的初步研究 随着抗菌药物的广泛应用和细菌耐药性的改变，传统常用的抗菌药物的耐药性逐年增加。胸外科手术前抗菌药物的使用可以有效降低术后感染的发生率。对于预防用抗菌药物，需要广泛覆盖大多数常见的红蓝色甲状细菌和阳性菌，以保持整个手术期间的有效组织强度。盐酸安妥沙星是中国第一个具有自主知识产权的一类新药氟喹诺酮类抗菌药物 (专利号Z7) , 由中国科学院药物研究所和安徽环球药业有限公司联合开发, 其为左氧氟沙星8-NH2衍生物, 8-NH2的引入提高了其抗菌活性, 对革兰阴性菌和阳性菌均有较好抗菌活性, 人体口服耐受良好, 口服生物利用度高。笔者选用400 mg盐酸安妥沙星术前单剂口服作为胸外科肺叶切除术预防感染方案, 并检测肺组织中盐酸安妥沙星药物浓度进行分析, 现报告如下。 1 数据和方法 1.1 药物治疗及仪器 沈阳医学院第二附属医院心胸外科2011年1月至2013年8月因周围型肺癌或中央型肺癌需行肺叶或单侧全肺切除术患者48例, 年龄均18岁, 术前无感染并3 d内未接受过抗菌药物治疗, 术前2周内未接受过氟喹诺酮类抗菌药物治疗, 受试前患者均签署知情同意书。盐酸安妥沙星片 (剂量100mg/片, 批号:101102, 安徽环球药业股份有限公司) ;盐酸昌欣沙星 (内标物, 浙江医药股份有限公司新昌制药厂) ;磷酸二氢钾为分析纯;四氢呋喃为色谱纯;乙酰胺为分析纯;其他试剂为市售色谱纯。美国Waters公司e2695高效液相色谱仪, Waters2475荧光扫描检测器, Empower2色谱工作站。美国Varian公司Bond Elut-C8固相萃取柱 (3 m L, 200mg) 。实验用水为Millipore纯水机生产。 1.2 流动相及荧光检测 色谱柱Waters Atlantic T3 (4.6 mm×150 mm, 5μm) , 流动相50 mmol·L-1磷酸二氢钾-四氢呋喃-1mol·L-1乙酰铵 (p H 2) =92∶7∶1, 荧光检测激发波长280 nm、发射波长450 nm, 柱温40℃。 1.3 上清液制备 患者按预估支气管断离时间点前4、8、12、24 h单剂口服盐酸安妥沙星片400 mg随机分为4组, 每组12例。支气管离断时留取4 m L左右血液, 置于肝素锂管内, 3 000 r·min-1离心10 min后, 取血浆-40℃保存待用;切除肺叶后于肺叶外周剪取1cm3左右正常肺叶组织, 生理盐水冲净表面残血, 吸净表面水分, 称量, 加50 mmol·L-1磷酸二氢钾 (KH2PO4) 缓冲液超声粉碎后离心, 取上清液-40℃保存待用。血样及组织标本液采用固相萃取处理方法, 固相萃取柱经甲醇和去离子水活化后, 加入上样液0.4 m L, 包括血样或组织标本液0.2 m L, 内标0.05 m L, 以1 m L 50 mmol·L-1磷酸二氢钾缓冲液冲洗2次, 用1 m L 50 mmol·L-1磷酸二氢钾的磷酸二氢钾-四氢呋喃=4∶1液留取, 取0.4 m L留取液在37℃水浴中用氮气吹干, 残留物用0.2 m L的8%四氢呋喃溶解, 离心后取上清液10μL进样分析。 2 结果 2.1 肺组织的重量 切除后取得正常肺组织的平均重量为 (0.303±0.091) g。 2.2 萃取回收率比较 盐酸安妥沙星高、中、低3个浓度水平4.000, 0.300, 0.020μg·m L-1在血浆和肺组织中萃取回收率均很高, 血浆和肺组织中萃取回收率均值分别为 (99.11±1.18) %和 (100.5±1.27) %。由于肺组织中回收率近100%, 以50 mmol·L-1磷酸二氢钾缓冲液制作标准曲线和质控, 并进行方法学验证, 验证通过后用于测定肺组织中盐酸安妥沙星浓度。 2.3 肺组织的固相萃取 采用盐酸安妥沙星标准曲线贮备液1 000μg·m L-1用磷酸二氢钾溶液稀释成0.010~5.000μg·m L-1浓度, 各取0.2 m L加入空白血浆0.2 m L及内标0.050 m L, 固相萃取后进样分析, 肺组织以相同方法进行。峰面积为纵坐标, 浓度为横坐标, 结果盐酸安妥沙星血浆和肺组织标准曲线范围均为0.010~5.000μg·m L-1, 最低检测浓度均为0.01μg·m L-1, 血浆线性关系为y=2.996 50x+0.075 31, 相关系数r=0.9996, 肺组织线性关系为y=3.131 26x+0.041 75, 相关系数r=0.999 8。 2.4 盐酸安妥沙星和内标物保留时间和杂峰对盐酸安妥沙星的干扰 盐酸安妥沙星和内标物峰形及分离度均良好, 盐酸安妥沙星和内标物保留时间分别约为3.29和3.40 min