PCR技术中的引物的本质和作用是什么.docx

PCR 技术中的引物的本质和作用是什么 引物是一小段单链DNA 或 RNA，引物可以做为DNA 复制开始时DNA 聚合酶的结合位点，在细胞外的条件下，只有通过引物，DNA 才可以开始进行复制。 引物是人工合成的两段寡核苷酸序列，一个引物与感兴趣区域一端的一条DNA 模板链互补， 另一个引物与感兴趣区域另一端的另一条DNA 模板链互补。 例如 (2011·北京理综，31)T－DNA 可随机插入植物基因组内，导致被插入基因发生突变。用此方法诱导拟南芥产生突变体的过程如下：种植野生型拟南芥，待植株形成花蕾时，将地上 部分浸入农杆菌(其中的T－DNA 上带有抗除草剂基因)悬浮液中以实现转化。在适宜条件下培养，收获种子(称为T1 代)。 为促进植株侧枝发育以形成更多的花蕾，需要去除 ，因为后者产生的 会抑制侧芽的生长。 为筛选出已转化的个体，需将T1 代播种在含 的培养基上生长，成熟后自交，收获种子(称为T2 代)。 为筛选出具有抗盐性状的突变体，需将 T2 代播种在含 的培养基上，获得所需个体。(4)经过多代种植获得能稳定遗传的抗盐突变体。为确定抗盐性状是否由单基因突变引起，需 将该突变体与 植株进行杂交，再自交 代后统计性状分离比。 (5)若上述 T－DNA 的插入造成了基因功能丧失，从该突变体的表现型可以推测野生型基因的存在导致植物的抗盐性 。 [解析] (1)为使侧枝发育形成更多的花蕾，要破坏顶端优势，因此，需去除顶芽，因为顶芽产生的生长素在侧芽积累，会抑制侧芽生长。(2)要筛选出抗除草剂的个体，应将T1 代播种在含一定浓度除草剂的培养基上生长。(3)要筛选出抗盐性状的个体，应将 T2 代播种在含一定浓度盐的培养基上生长。(4)要确定抗盐性状是否由单基因突变引起，需将突变体与野生型植株进 行杂交，得到 F1，再让 F1 自交，统计 F2 的性状分离比。 (5)抗盐突变体的抗盐性强，野生型基因的存在会降低植物的抗盐性。(6)PCR 技术可扩增基因，先应提取突变体 DNA 作目的基因，然后用同一种限制酶处理目的基因和运载体，再用 DNA 连接酶连接成重组 DNA，从图中可看出A、D 为模板链，B、C 为引物。 [答案] (1)顶芽 生长素 (2)(一定浓度的)除草剂 (3)(一定浓度的)盐 (4)野生型 1 (5)降低 (6)突变体 DNA 连接酶 B、C 启动子和引物两者的区别是什么 启动子是DNA 分子上能与RNA 聚合酶结合并形成转录起始复合体的区域，在许多情况下， 还包括促进这一过程的调节蛋白的结合位点，决定RNA 聚合酶转录起始位点的DNA 序列。 引物是一小段单链DNA 或RNA，引物可以做为DNA 复制开始时DNA 聚合酶的结合位点，在细胞外的条件下，只有通过引物，DNA 才可以开始进行复制。引物是人工合成的两段寡核苷酸序列，一个引物与感兴趣区域一端的一条DNA 模板链互补，另一个引物与感兴趣区域另一端的另一条DNA 模板链互补。 启动子是位于结构基因前的非编码区对转录起调控作用的一段DNA 序列。引物则是游离于 DNA 复制的模板链之外的对DNA 复制起调控作用的一小段单链DNA 或 RNA。