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黄粉虫活性蛋白的提取纯化及其作用性质研究的中期报告
本研究的目的是提取和纯化黄粉虫的活性蛋白,并研究其生物活性和作用性质。在前期工作的基础上,本期研究主要包括以下工作:
1. 黄粉虫体内活性蛋白的提取和分离
首先,我们采用溶解-沉淀法提取黄粉虫体内的活性蛋白。将黄粉虫体重复冻融10次后,用1% Triton X-100和100 mM Tris-HCl缓冲液(pH 7.0)润湿虫体,离心后将上清液加入60%硫酸铵,沉淀蛋白质后再用50%乙醇洗涤。得到的沉淀物中含有大量的蛋白质,并具有显著的酯酶活性和抗氧化活性。
其次,我们用分离层析技术分离提取到的蛋白质。采用DEAE纤维素阴离子交换层析柱进行初步分离,得到了两个部分:一个是强阳离子交换的部分,另一个是弱阳离子交换的部分。然后,将强阳离子交换的部分进行进一步纯化,用分子筛层析法分离出目标蛋白质,并用SDS检测到其分子量为50 kDa。
2. 黄粉虫活性蛋白的生物活性研究
我们对提取纯化的黄粉虫活性蛋白进行了一系列的生物活性研究。首先,用酯酶活性测定和胆固醇酯酶活性测定,证明该蛋白质对脂肪的降解具有强的催化作用。其次,针对其可能的抗氧化活性,我们进行了氧自由基清除能力实验和雌激素释放试验,发现该蛋白能够有效地清除氧自由基并拉升雌激素水平。综合以上,该蛋白质具有良好的功能活性,可以应用于医药、保健等领域。
3. 黄粉虫活性蛋白的作用性质研究
最后,我们对黄粉虫活性蛋白的作用性质进行了初步研究。在大鼠模型实验中,用口服方式给予不同剂量的黄粉虫活性蛋白,观察其对肝脏和肾脏的影响。结果表明,该蛋白质具有一定的肝脏和肾脏维护作用,能够减轻大鼠脂肪肝和肾脏病的程度。但是需要进一步的深入研究,探讨其作用机制等问题。
总之,本研究的初步结果表明黄粉虫体内提取的活性蛋白具有多种生物活性和作用性质,能够在医药、保健等领域应用。未来还需要进一步完善实验,探究其作用机理等问题。
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