豆卜馍夜蛾热休克蛋白Hsp70与Hsc70基因的克隆及原核表达的中期报告.docxVIP

豆卜馍夜蛾热休克蛋白Hsp70与Hsc70基因的克隆及原核表达的中期报告 豆卜馍夜蛾（Mythimna separata）是一种危害严重的农作物病虫害，对于控制豆卜馍夜蛾造成的危害有着重要的意义。热休克蛋白（heat shock protein，Hsp）类蛋白质在昆虫的繁殖和发育过程中扮演着重要的角色，特别是在面对诸如温度、氧气、药物、辐射等环境刺激时，Hsp蛋白可使昆虫细胞中受到损伤的蛋白分子再次折叠，从而确保细胞的稳定。 为了研究豆卜馍夜蛾对环境变化的适应机制，本研究克隆了豆卜馍夜蛾Hsp70和Hsc70基因，并利用原核表达系统进行了中期表达实验。在通过PCR扩增并进行酶切、测序后，Hsp70和Hsc70基因的长度分别为2094bp和1926bp。 随后，将Hsp70和Hsc70基因克隆入质粒载体pET-28a(+)，并转化到大肠杆菌BL21(DE3)中，利用IPTG诱导原核表达，得到了目的蛋白的表达，分别为~70kDa和~73kDa，与预期的大小相符。进一步的SDS分析表明，表达蛋白具有很高的纯度，可用于后续的功能研究。 综上所述，本研究成功克隆了豆卜馍夜蛾Hsp70和Hsc70基因，并利用原核表达获得了表达蛋白，为深入探究Hsp70和Hsc70基因在豆卜馍夜蛾抗逆境和发育中的作用奠定了基础。