极端嗜盐古菌酯酶嗜盐机理的研究及极端微生物酯水解酶的发掘的中期报告.docxVIP

极端嗜盐古菌酯酶嗜盐机理的研究及极端微生物酯水解酶的发掘的中期报告 引言： 随着社会的发展和人类对环境的需求，极端环境中的微生物逐渐引起了人们的关注。极端嗜盐古菌是一种在高盐环境下广泛分布的微生物，具有很强的嗜盐性，其酯酶在嗜盐性中起着至关重要的作用。本研究旨在对极端嗜盐古菌中酯酶嗜盐机理的研究及极端微生物酯水解酶的发掘进行研究。 材料和方法： 1. 极端嗜盐古菌的筛选与鉴定 从不同来源的嗜盐环境中采集样品，进行嗜盐古菌的筛选。采用形态学、生理生化、16S rRNA序列等方法进行鉴定，鉴定出了6株嗜盐古菌。 2. 极端嗜盐古菌酯酶的筛选与鉴定 采用pNP酯类底物对筛选出的6株嗜盐古菌进行酯酶测定，测得了其中3株嗜盐古菌具有较强的酯酶活性。利用SDS和Native对酯酶进行分离和鉴定，得到了酯酶在SDS上的分子量为35 kDa，Native上的相对分子质量为70 kDa。 3. 极端嗜盐古菌酯酶的嗜盐机理研究 采用不同NaCl浓度的缓冲液对筛选出的酯酶进行嗜盐性测定，发现酯酶的最适NaCl浓度为3 M。同时，利用荧光光谱、紫外吸收光谱等方法研究了酯酶在高盐环境中的构象和结构变化。 4. 极端微生物酯水解酶的发掘 从不同极端环境中分离筛选了大量的微生物，利用pNP酯类底物对其酯水解酶进行筛选，发现了多株具有不同酯水解活性的微生物。 结果： 1. 成功鉴定出6株嗜盐古菌，其中3株具有较强的酯酶活性。并且得到了酯酶在SDS上的分子量为35 kDa，Native上的相对分子质量为70 kDa。 2. 发现筛选出的酯酶最适NaCl浓度为3 M，并且在高盐环境下酯酶的构象和结构发生了变化，这表明嗜盐环境对酶的嗜盐性具有重要影响。 3. 通过对不同极端环境中微生物的筛选，成功发现了多株具有不同酯水解活性的微生物。 结论： 本研究对极端嗜盐古菌中酯酶嗜盐机理的研究及极端微生物酯水解酶的发掘进行了初步研究。研究结果表明，在高盐环境下酶的嗜盐性受到显著影响，同时还发现了多株具有不同酯水解活性的微生物，这为后续的研究提供了重要的基础。