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no供体硝酸酯类甘草次酸衍生物的合成及表征 作为体内重要的信使和活性物质，一氧化氮（no）可参与各种生理和病理过程。研究表明,高浓度的NO具有诱导肿瘤细胞凋亡、阻止癌细胞扩散和转移等作用。有机硝酸酯类化合物是一类重要的NO供体。前期研究发现,甘草次酸(GA)30位羧基通过连接基团与硝酸酯偶联形成的衍生物部分具有较强的抗肿瘤活性。为了进一步了解NO供体型硝酸酯类GA衍生物的构效关系,本研究通过不同的脂肪链连接基团,一方面将GA分子中的3位羟基与硝酸酯片段偶联;另一方面,在GA的3位羟基和30位羧基同时引入两个硝酸酯片段,以便考察化合物的抗肿瘤活性是否会随NO供体数目的增加而增强。为此,本研究共设计、合成了9个未见文献报道的NO供体型硝酸酯类GA衍生物,并采用MTT法体外测定了目标化合物对4种人肿瘤细胞株增殖的抑制作用。 1 目标化合物的合成 GA在酸性条件下与甲醇反应得甘草次酸甲酯(1),化合物1在4-二甲氨基吡啶(DMAP)作用下与丁二酸酐反应制得3β-(3-羧基-丙酰基)氧基-甘草次酸甲酯(2),化合物2与相应的二溴烷烃反应生成酯类中间体3a～3e,化合物3a～3e于乙腈中与硝酸银反应得目标化合物4a～4e;乙醇胺经发烟硝酸硝化生成2-硝基氧乙胺(5),在二环己基碳二亚胺(DCC)和DMAP作用下,化合物2与5缩合制得化合物4f。合成过程见路线1。 GA在DMAP作用下与丁二酸酐反应得甘珀酸(6),化合物6再与相应的二溴烷烃制得中间体7a～7c,化合物7a～7c与硝酸银于乙腈中回流得目标化合物8a～8c。合成过程见路线 2。目标化合物4a～4f和8a～8c未见文献报道,其结构均经IR、MS和1H NMR确证。 2 化学成分 2.1 n-fmr压片 熔点用天津分析仪器厂RY-1型熔点仪测定,温度计未经校正;IR用Nicolet Impact 410型或岛津FTIR-8400S型红外光谱仪测定,KBr压片;1H NMR 用ACF-300 MHz型磁共振仪测定,TMS为内标;MS用Agilent 1100 series LC/MSD Trap(SL)型质谱仪测定。柱色谱使用青岛海洋化工厂粗孔(ZCX-Ⅱ)型100～200目或200～300目柱色谱硅胶。所有溶剂均经严格无水处理,试剂均为市售化学纯或分析纯产品,甘草次酸(98%)购于南京清泽医药有限公司,18β-甘草次酸甲酯(1)参照文献方法合成,化合物5参照文献方法制备。 2.2 草次酸甲酯3a的合成 3β-(3-羧基-丙酰基)-氧基-18β-甘草次酸甲酯(2)的合成 将18β-甘草次酸甲酯10.48 g(1.00 mmol)、丁二酸酐0.60 g(6.00 mmol)、DMAP 0.16 g(1.30 mmol)、CH2Cl220 mL 依次加入反应瓶中,加热回流反应15 h,反应液水洗3次,浓缩,甲醇-水重结晶得白色粉末0.57 g,收率98.4%,mp:260～262 ℃(文献262～264 ℃)。 3β-[[4-(2-溴)-乙氧基]-1,4-丁二酰基]-氧基-18β-甘草次酸甲酯(3a) 将化合物2 0.54 g(1.00 mmol)、K2CO30.28 g(2.00 mmol)、DMF 20 mL 依次加入反应瓶中,缓慢滴加1,2-二溴乙烷0.40 mL(4.60 mmol),室温反应4 h,往反应液中加入水200 mL,用乙酸乙酯(50 mL×3)萃取,合并有机层,饱和食盐水洗,无水硫酸钠干燥,过滤,浓缩,柱色谱(乙酸乙酯-石油醚,1∶5)分离得白色固体0.50 g,收率85%,mp:169～171 ℃,ESI-MSm/z:692.2[M+H]+。 3β-[[4-(3-溴)-丙氧基]-1,4-丁二酰基]-氧基-18β-甘草次酸甲酯(3b) 参照化合物3a的制备方法,由1,3-二溴丙烷制得白色固体,收率86%,mp:158～160 ℃,ESI-MSm/z:706.4[M+H]+。 3β-[[4-(4-溴)-丁氧基]-1,4-丁二酰基]-氧基-18β-甘草次酸甲酯(3c) 参照化合物3a的制备方法,由1,4-二溴丁烷制得白色固体,收率87%,mp:151～153 ℃,ESI-MSm/z:720.3[M+H]+。 3β-[[4-(5-溴)-戊氧基]-1,4-丁二酰基]-氧基-18β-甘草次酸甲酯(3d) 参照化合物3a的制备方法,由1,5-二溴戊烷制得白色固体,收率86%,mp:128～130 ℃,ESI-MSm/z:734.4[M+H]+。 3β-[[4-(6-溴)-己氧基]-1,4-丁二酰基]-氧基-18β-甘草次酸甲酯(3e) 参照化合物3a的制备方法,由1,6-二溴己烷制得白色固体,收率85%,mp:102～104 ℃,ESI-MSm/z:748.2[M+H]+。