DB21∕T2050-2012饲料中林可霉素的测定.docVIP

DB21∕T 2050-2012 饲料中林可霉素的测定 ICS 65.120 ,46 DB21 辽宁省地方标准 DB 21/ XXXXX—XXXX 饲料中林可霉素的测定 超高效液相色谱 串联质谱法 点击此处添加标准英文译名 点击此处添加与国际标准一致性程度的标识 (报批稿) XXXX - XX - XX发布 XXXX - XX - XX实施 发布辽宁省质量技术监督局 DB21/ XXXXX—XXXX 前 言 本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。 本标准由辽宁省畜牧兽医局提出并归口。 本标准起草单位:辽宁省兽药饲料畜产品质量安全检测中心。 本标准主要起草人:张秀芹、陈玉艳、杨希国、张天姝、刘凯、何为、刘笑、吕晓惠、杨慧杰、于 家丰、李雪兰、刘昕、韩春晓 I DB21/ XXXXX—XXXX 饲料中林可霉素的测定 超高效液相色谱串联质谱法 1 范围 本标准规定了饲料中林可霉素的超高效液相色谱串联质谱法。 本标准适用于饲料中林可霉素的检测。超高效液相色谱串联质谱法检测限为100μg/kg。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规则和试验方法 Animal feeding stuffs—Sampling,IDT) GB/T 14699.1 饲料 采样(ISO 6497 ， 3 试样的制备 按GB/T14699.1采样,选取有代表性的饲料样品至少500g,四分法缩减至100g,经粉碎,全部过1mm孔筛,混匀装入磨口瓶中备用。 4 原理 试样中林可霉素加入5%甲醇水溶液超声提取20min，提取液经净化过膜后，上超高效液相色谱串联质谱仪检测。 5 试剂和材料 5.1 试剂和溶液 5.1.1 除特殊注明外，本标准所用试剂均为分析纯。水为去离子水，符合GB/T6682一级水的规定 5.1.2 林可霉素对照品纯度?98.0%。 5.1.3 乙腈(色谱纯)。 5.1.4 林可霉素标准贮备液(1.0mg/mL):准确称取50mg林可霉素对照品，用超纯水溶解并稀释至50mL容量瓶中，贮存于0?~8?冰箱中，有效期3天。 5.1.5 林可霉素标准工作液:用流动相稀释并定容,根椐需要现用现配。 1 DB21/ XXXXX—XXXX 5.1.6 ,%的甲醇水溶液:取50mL甲醇(9.1)，加水定容至1L。 5.1.7 滤膜。 5.1.8 1mL注射器。 5.1.9 高纯氮气:纯度99.99%。 5.1.10 高纯氩气:纯度99.99%。 5.1.11 SPE小柱:oasis HLB小柱(3cc)。 5.2 仪器和设备 5.2.1 离心机:离心转速7000r/min。 5.2.2 分析天平:感量0.01g和感量0.00001g。 5.2.3 移液器及配套枪头:单道10μL,1000μL。 5.2.4 小型粉碎机。 5.2.5 超声波发生器。 5.2.6 超高效液相色谱,串联质谱。 5.2.7 涡旋振荡器。 6 测定步骤 6.1 试样的提取 称取试样10.00g?0.05g,加入80mL5%甲醇水溶液超声提取20min，7000r/min离心5分钟。上清液过 固相小柱(5.1.11)。固相小柱事先分别以2mL甲醇、2mL水活化。将提取液上清2 mL过SPE小柱， 再分 别以2mL5%甲醇水溶液、2mL水淋洗，抽干，用2mL甲醇洗脱，洗脱液用适当水稀释，过0.22um滤膜，上 机。 6.2 超高效液相色谱,串联质谱 6.2.1 液相条件 a)色谱柱:C50mm×2.1mm，粒径1.7μm。或其他等同效果的C柱。 18 18b)柱温:40?。 c)进样量:5μL。 d)流动相流速:0.2mL/min。 e)流动相洗脱程序:梯度洗脱，见表1。 表1:流动相洗脱程序 时间 乙腈 水 0 5 95 0.3 50 50 2 DB21/ XXXXX—XXXX 0.7 35 65 1.4 20 80 1.5 5 95 3.0 5 95 6.2.2 质谱条件 a)离子源:电喷雾正离子源 b)检测方式:多反应监测。 c)脱溶剂气和锥孔气均为高纯氮气，碰撞气为高纯氩气。 d)脱溶剂气体流量:550L/h。 e)锥孔气流量:50L/h。 f)脱溶剂温度:400?。 g)源温度:120?。 h)毛细管电压、锥孔电压、碰撞能量等电压值以自动调谐值计。 i)定性离子对、定量离子对及对应的保留时间、锥孔电压和碰撞能量见表2。 被测物名称 定性离子对m/z