高二生物苏教版课件：微生物的实验室培养.pptVIP

思考： 溶化时为什么要将牛肉膏连同称量纸一起加热? ②加琼脂的目的是什么?为什么要用玻璃棒搅拌？ ③在灭菌前, 用牛皮纸、旧报纸包紧盛有 培养基的锥形瓶的目的是什么？ ④培养皿能否用高压蒸汽灭菌？ 可保证粘附在称量纸上的牛肉膏也能溶于水中,减少误差 作为凝固剂；防止琼脂糊底导致烧杯破裂。 在灭菌时能避免水蒸汽凝结时浸湿棉塞,在取出培养基锥形瓶时也起到隔绝空气中杂菌污染的作用 不能,因为培养皿要保持干燥,应该用干热灭菌. 3、有关倒平板的操作错误的是（ ） A.将灭过菌的培养皿放在火焰旁的桌面上 B.使打开的锥形瓶瓶口迅速通过火焰 C.等待平板冷却凝固后需要倒过来放置 D. 将培养皿打开，培养皿盖倒放在桌子上 D （二）纯化大肠杆菌 平板划线法 微生物的接种技术介绍 最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法 单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖时，就会形成一个肉眼可见的，具有一定形态结构的子细胞群体，叫做菌落。 菌落是鉴定菌种的重要依据。 1. 操作的第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物；每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后，接种环上残留的菌种，使下一次划线时，接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端，从而通过划线次数的增加，使每次划线时菌种的数目逐渐减少，以便得到菌落。划线结束后灼烧接种环，能及时杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者。 问题讨论 2.在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行划线？ 以免接种环温度太高，杀死菌种。 了解有关微生物及培养基的基础知识，进行无菌技术的操作，进行微生物的培养。 知识目标： 掌握培养基的制备、高压蒸气灭菌和平板划线法等基本操作技术，熟练、规范地进行无菌操作，成功地培养微生物。 无菌技术的操作。 课题重点和难点： 技能目标： 专题2 :微生物的培养与应用 课题1 微生物的实验室培养 微生物类型 原核生物界 原生生物界 真菌界 病毒界 (细菌、放线菌、蓝藻) (酵母菌霉菌大型真菌) (草履虫变形虫衣藻) (噬菌体、艾滋病毒) 约有10万种 (一)、微生物特点：结构都相当简单,进化地位低，个体多数十分微小.通常要用光学显微镜或电子显微镜才能看到，有的甚至没有细胞结构. 一、基础知识： 繁殖快 、 代谢类型多、分布广泛 、数量多 、易变异  一、基础知识： （二）培养基 人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。 （1）按物理状态分：固体培养基、半固体培养基和液体培养基。其中固体培养基用于菌种保存及分离、鉴定菌落、活菌计数、保藏等，液体培养基常用于发酵工业。 1.培养基的类型和用途 注意：目的明确、营养协调、条件适宜、经济节约。 液体培养基与固体培养基 选择培养基:从微生物群中选择具有特定表型的细胞.使之进行繁殖所用的培养基,称为选择培养基. 加入青霉素的培养基:分离到酵母菌、霉菌等真菌 加入高浓度食盐的培养基:分离到金黄色葡萄球菌 不加氮源的无氮培养基: 分离到固氮菌 不加含碳有机物的无碳培养基:分离到自养型微生物 如：当大肠杆菌分解乳糖产酸就与伊红和美蓝结合形成黑色菌落，或带有绿色金属光泽。 鉴别培养基： 根据微生物的代谢特点，在培养基中加入某种指示剂或化学药品配制而成的，用以鉴别不同种类的微生物。 （2）按功能分：选择培养基和鉴别培养基。 天然培养基有血清、血浆、和组织提取液（如鸡胚和牛胚浸液）。 优点：营养成分丰富，培养效果好 缺点：来源受限;成分复杂，影响对某些实验产物的提取和实验结果的分析;易发生支原体污染; 根据细胞生存所需物质的种类和数量，用人工方法模拟合成的。 合成培养基主要成分是氨基酸、维生素、碳水化合物、无机盐和其它一些辅助物质。 优点：标准化生产，组分和含量相对固定;成本低 缺点： 缺少某些成分，不能完全满足体外细胞生长需要。 合成培养基: 天然培养基： （3）按成分分：天然培养基和合成培养基。 2.培养基成分 不管哪种培养基，一般都含有水、碳源、和氮源、 无机盐、等营养，另外还需要满足微生物生长对pH（真菌5.0-6.0，细菌6.5-7.5，放线菌7.5-8.5）、特殊营养物质,例如:生长因子(即细菌生长必需，而自身不能合成的化合物,如维生素、某些氨基酸、嘌呤、嘧啶)以及氧气等的要求。 营养要素 定义 作用 主要来源 碳源 凡能提供所需碳元素的物质 构成生物体的细胞物质和一些代谢产物，有些是异养生物的能源物质 无机化合物：CO2、NaHCO3 有机化合物：糖类、脂肪酸、花生粉