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骨肉瘤U2OS和结肠癌HT29耐MTX细胞系的建立的中期报告
本次项目旨在建立骨肉瘤U2OS和结肠癌HT29两种细胞系的耐MTX(甲氧苄啶)模型,以研究化疗耐药机制和发掘新的治疗靶点。目前已经完成了实验第一、二阶段。
实验设计
首先,我们通过MTX的逐步加量筛选,筛选出两种细胞系的IC50(50%抑制浓度),并针对IC50浓度进行维持培养,制备耐MTX产物细胞系。接着,MTX耐药细胞系将进一步分别用于实验室基础研究,包括生物学特性分析、信号通路分析和新靶点筛选,以及进行体内实验验证。
实验结果
在实验第一阶段中,U2OS和HT29细胞分别经过逐步加量筛选,成功得出了MTX的IC50浓度,并维持了多代子细胞系。在实验第二阶段中,两种细胞系经过连续长时间培养和药物压力下的诱导,分别得到了U2OS-R和HT29-R两种经MTX耐药细胞系。
下一步计划
接下来,我们将对U2OS-R和HT29-R进行系列实验,主要目的包括:1)鉴定与比较MTX耐药细胞系和其原始细胞系的生物学特性差异;2)筛选与MTX耐药相关的新的信号调控通路;3)研究MTX耐药机制,寻找新的治疗靶点。同时,我们将进行体内验证实验,探索MTX耐药细胞系在动物体内的表现和治疗效果。
结论
本次实验已经成功建立了骨肉瘤U2OS和结肠癌HT29两种细胞系的耐MTX模型,并取得了中期进展。基于这一成果,我们将进一步开展研究工作,拓展耐药系列细胞模型并寻找新的治疗方案。
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