光合作用的有关机理详解演示文稿.pptVIP

产物抑制：PEP抑制PPDK的活性； 光的调节：光活化PPDK的速度很快(类似与Ru-5-PK的光活化)； 磷酸化作用的调节： 活化态PPDK 钝化态PPDK 磷酸化 脱磷酸化 * * 当前第63页\共有96页\编于星期四\19点 丙酮酸磷酸二激酶活化-钝化的可逆磷酸化过程 图2-18 丙酮酸磷酸二激酶活化-钝化的可逆磷酸化过程 （Ottaway,1988） E: PPDK,丙酮酸磷酸二激酶; PDRP: 丙酮酸磷酸二激酶调节蛋白 * * 当前第64页\共有96页\编于星期四\19点 主要分布于叶肉细胞的叶绿体中，催化下列反应： OAA+NADPH 苹果酸+NADP+ NADP-MD (1) 光／暗调节: 活化 钝化 黑暗 照光 (2) 光合电子传递链还原组分的调节: 钝化 活化 铁氧还蛋白／硫氧还蛋白/DTT 氧化 (3) NADP-苹果酸脱氢酶(NADP-MD) * * 当前第65页\共有96页\编于星期四\19点 NADP-铁氧还蛋白与硫氧还蛋白对NADP-MD活化-钝化的调节 图2-19 NADP-铁氧还蛋白与硫氧还蛋白对NADP-MD活化-钝化的调节（Jiao et al., 1991） * * 当前第66页\共有96页\编于星期四\19点 催化苹果酸的氧化脱羧： 苹果酸+NADP+ 丙酮酸+CO2+NADPH 可逆反应，但向前反应速度为逆反应速度的30倍 NADP-ME NADP-ME的调节 受pH和Mal的共同调节： Mal(mmol/L) 0.1 10 NADP-ME最适pH 7.4 8.5 pH7.5时，1mmol/L的Mal抑制NADP-ME的活性 (4) NADP-苹果酸酶(NADP-ME) * * 当前第67页\共有96页\编于星期四\19点 NADP-ME不受光和代谢产物的调节。 但光下引起叶绿体间质pH的增加，可增加NADP-ME 对Mal的脱羧速率。 存在于鞘细胞线粒体中， 苹果酸 丙酮酸 + CO2 NAD-ME Mn2+, NAD + 该酶以二聚体、四聚体和八聚体形式存在。其离体活性受多种效应剂，如FBP、乙酰CoA、CoA、HCO3- 调节。 (5) NAD苹果酸酶 (NAD-ME) * * 当前第68页\共有96页\编于星期四\19点 暗叶的粗酶液 甲醇或硫酸铵 Servaites(1985): Rubisco的 暗抑制解除 Seeman等（1985） : 暗叶的粗酶液 碱性磷酸酯酶处理 Rubisco的 暗抑制解除 暗叶的粗提液中存在的是一种磷酯类化合物抑制剂 ： 一种6-碳中间产物类似物，即2-羧基阿拉伯糖醇-1-磷酸（CA-1-P）。 * * 当前第31页\共有96页\编于星期四\19点 CA-1-P仅存在于某些植物中： 菜豆：CA-1-P的含量特别高，完全抑制暗中Rubisco活性； 大豆、马铃薯和烟草：CA-1-P的含量较高，抑制暗中的Rubisco活性达50% ； 菠菜、小麦和拟南芥等许多植物中几乎检测不到CA-1-P的存在 。 CA1P的抑制机制： CA-1-P与活化的Rubisco紧密结合，阻断RuBP与酶的结合，使氨基甲酰化的Rubisco转变为不能进行催化的形式，但不改变酶的氨基甲酰化作用。 * * 当前第32页\共有96页\编于星期四\19点 CA-1-P-Rubisco 复合体 光(NADPH-磷酸酯酶) Rubisco活化酶 暗 CA-1-P + Rubisco CA-1-P抑制机制的解除： * * 当前第33页\共有96页\编于星期四\19点 2.3.1 Rubisco的纯化方法 方法Ⅰ： 粗酶液 （叶片匀浆） 硫酸铵分部沉淀 离子交换层析和 凝胶过滤层析 蔗糖密度梯度离心 纯化的Rubisco * 粗酶液中加入ATP显著提高Rubisco 的热稳定性。中性条件下于85℃加热10min，可使其他蛋白和蛋白水解酶变性沉淀，大大改善Rubisco 的纯化效果。