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试管编号 1 1′ 2 2′ 3 3′ 实 验 步 骤 一 2 mL淀粉酶溶液 2 mL可溶性淀粉溶液 2 mL淀粉酶溶液 2 mL可溶性淀粉溶液 2 mL淀粉酶溶液 2 mL可溶性淀粉 溶液 二 在冰水中水浴5 min 在60 ℃温水中水浴 5 min 在沸水中水浴5 min (4)实验步骤、现象及结论。 取 6 支试管,分别编号为 1 与 1′、2 与 2′、3 与 3′,并分别进 行以下操作。 试管编号 1 1′ 2 2′ 3 3′ 实 验 步 骤 三 1 与 1′试管内液体混 合,摇匀 2 与 2′试管内液体混 合,摇匀 3 与 3′试管内液体混 合,摇匀 四 在冰水中水浴数分 钟 在 60 ℃温水中水浴 相同时间 在沸水中水浴相同时 间 五 取出试管,分别滴加 2 滴碘液,摇匀,观察现象 实验现象 呈_______ _____________ 呈_______ 结论 酶发挥催化作用需要适宜的温度条件,温度过高和过低都将影响 酶的活性 (续表) 蓝色 无蓝色出现 蓝色 (1)探究温度对酶活性的影响时,一定要让反应物和酶在各自 所需的温度下保温一段时间,再进行混合。 (2)选择淀粉和淀粉酶来探究酶的最适温度时,检测试剂不可 用斐林试剂代替碘液,因为斐林试剂需在水浴加热条件下才会发 生特定的颜色反应,而该实验中需严格控制温度。 (3)探究温度对酶活性的影响时,不宜用 H2O2 作反应物,因为 H2O2 易分解,加热条件下其分解会加快,氧气的产生速率增加, 并不能准确反映酶活性的变化。 3.探究 pH 对酶活性的影响。 (1)反应原理(用反应式表示)。 2H2O2 2H2O+O2 (2)鉴定原理:pH 影响酶的活性,从而影响氧气的生成速率, 可用带火星的卫生香燃烧的情况来检验 O2 的生成速率。 (3)设计实验。 ①材料:宜选用过氧化氢和肝脏研磨液探究 pH 对酶活性的影 响,而不选用淀粉和淀粉酶。因为调节 pH 值所营造的酸性环境会 干扰斐林试剂(碱性)对淀粉水解的检测,且酸性环境下,淀粉还会 水解,碱性环境会干扰碘液与淀粉的蓝色反应。 ②实验设计思路(包括自变量、如何控制自变量、因变量、如 何检测因变量、怎样对无关变量进行控制、对照实验)。 自变量 pH 控制自变量 将等量的氢氧化钠、盐酸和 pH=7 的缓冲液分 别放入装有等量酶的试管中,进行对照实验 因变量 过氧化氢的分解速率 检测因变量 观察气泡产生的情况(或插入卫生香,观察复燃 情况) 对无关变量 进行控制 溶液的量以及试管洁净度等保持相同 步骤 试管 1 试管 2 试管 3 第一步 加入 2 滴肝脏研磨液 第二步 1 mL pH=7 的缓冲液 1 mL 盐酸溶液 1 mL NaOH 溶液 第三步 加入 2 mL H2O2 溶液 第四步 观察气泡生成速率(或插入卫生香,观察复燃情况) (4)进行实验。 (5)实验结果:氢氧化钠和盐酸两组无明显气泡产生(或卫生香 不复燃),pH=7 的缓冲液组有大量气泡产生(或卫生香复燃)。 (6)实验结论:酶的作用需要适宜的 pH,pH 偏高或偏低都会 使酶活性降低。 4.实验注意事项。 (1)在探究温度对酶活性的影响的实验中,不宜选择过氧化氢 (H2O2)和过氧化氢酶作为实验材料,因为过氧化氢(H2O2)在常温常 压下就能分解,加热条件下分解会加快,从而影响实验结果。 (2)在探究 pH 对酶活性的影响实验中,不宜选用淀粉和淀粉 酶作为实验材料,因为在酸性条件下淀粉本身分解也会加快,从 而影响实验结果。 (3)在探究温度对酶活性的影响的实验中,底物和酶溶液应先 分别在预设的温度中保温一段时间后再混合,保证反应从一开始 就是预设的温度。 (4)探究 pH 对酶活性的影响时,必须先调 pH,然后再将反应 物与酶混合,否则反应物会在未调节好 pH 的情况下就在酶的作用 下发生反应,影响实验的准确性。另外,本实验中也可将过氧化 氢酶溶液和过氧化氢溶液分别调至同一 pH 再混合,以保证反应开 始便达到预设 pH。 (5)探究 pH 对酶活性的影响时,不能用斐林试剂作指示剂, 因为盐酸会和斐林试剂发生反应,使斐林试剂失去作用。 [典例](2021 年浙江 6 月选考)下列关于酶的特性及其影响因素 相关实验的叙述,正确的是( ) A.“酶的催化效率”实验中,若以熟马铃薯块茎代替生马铃 薯块茎,实验结果相同 B.“探究 pH 对过氧化氧酶的影响”实验中,分别加入不同 pH 的缓冲液后再加入底物 C.“探究酶的专一性”实验中,设置 1、2 号试管的目的是检 验酶液中是否混有还原糖 D.设计温度对蛋白酶活性影响的实验方案时,可选择本尼迪 特试剂(斐林试剂的改良试剂
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