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- 2023-09-26 发布于上海
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铜绿假单胞菌重组Bb-OprF疫苗构建及其免疫机制的初步研究的中期报告
本次研究旨在构建一种铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)重组Bb-OprF疫苗,并探究其免疫机制。在研究的中期阶段,我们完成了以下工作:
1. 基因克隆和表达:根据Bb-OprF抗原的序列设计引物,扩增并克隆了目标基因。将重组质粒转化至宿主菌表达,经纯化和检测后,得到了高纯度的重组蛋白。
2. 免疫动物及实验组设计:选用小鼠作为实验动物,在免疫试验前将它们随机分为3组:对照组、低剂量组和高剂量组。对照组注射PBS缓冲液,低剂量组注射低浓度疫苗制剂,高剂量组注射高浓度疫苗制剂。
3. 检测免疫效果:采用ELISA法检测小鼠血清中的疫苗特异性抗体浓度,结果显示,高剂量组的血清中疫苗特异性抗体浓度显著高于低剂量组和对照组。
4. 免疫机制初步探究:检测小鼠体内的细胞免疫反应,发现高剂量组小鼠体内的IL-2、IFN-γ、IL-4、IL-10等免疫因子表达水平均明显高于低剂量组和对照组。
综上所述,本研究成功构建了铜绿假单胞菌重组Bb-OprF疫苗,并发现高剂量免疫对小鼠产生了较强的免疫效果和细胞免疫反应,这为深入探究该疫苗的免疫机理和进一步临床应用提供了初步依据。
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