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- 2023-09-27 发布于上海
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大鼠脂肪来源干细胞的分离、培养及不同诱导液对其细胞状态的影响的中期报告
本研究旨在分离、培养大鼠脂肪来源干细胞(rASCs),并研究不同诱导液对其细胞状态的影响。目前进行了以下工作:
1.分离rASCs的实验设计:8只SD大鼠体重为200~250g,取腹腔脂肪制备成细胞悬浮液,进行胶原酶消化,将rASCs分离出来。采用显微镜进行细胞形态观察,计算细胞数量,用流式细胞仪分析其CD29、CD44、CD45和CD31等标记物的表达情况。
2. rASCs的培养和鉴定:将rASCs悬液接种于培养瓶中,在体外环境下进行培养。观察和记录rASCs在不同时间段内的生长情况,检测其酸碱度、菌落污染情况,采用多向分化法验证其干细胞的特性。
3.四种不同诱导液对rASCs状态的影响:将rASCs分为四组,分别采用脂肪、软骨、骨和肌肉四种不同诱导液进行诱导,在培养过程中进行观察和记录,记录生长时间和细胞状态。然后采用荧光显微镜和qPCR等方法检测细胞多向分化的情况。
初步结果表明,我们成功地分离并鉴定了rASCs,证实其具有多能性,能够分化成三种不同的细胞系。在四种不同诱导液中,肌肉诱导液能够最快地诱导rASCs分化成肌细胞,而软骨和骨诱导液能够诱导rASCs分化成软骨和骨细胞。这一研究有望促进干细胞研究领域的进一步探索。
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