中间纤维intermediate filament分析和总结.docxVIP

中间纤维 intermediate filament 60年代中期，在哺乳动物细胞中发现 10nm 纤维，因其直径介于肌粗丝和细丝之间，故被命名为中间纤维(又称中间丝， intermediate filament ，IF)(图9－19)。(一)成分 中间纤维的成分比微丝和微管复杂，按其组织来源及免疫原性可分为 5类(表9－3)：(1)角蛋白纤维(keratin filament) ，存在于上皮细胞中；(2)波形纤维(vimentin filament) ，存在于间质细胞和中胚层来源的细胞中； (3) 结蛋白纤维(des min filament) ， 存在于肌细胞中； (4) 神经元纤维(neurofilament) ，存在于神经元中； (5)神经胶质纤维(neuroglial filament) ，存在于神经胶质细胞。中间纤维的分布具有严格的组织特异性。这一点已被应用于肿瘤临床鉴别诊断， 以鉴别肿瘤细胞的组织来源，显示了良好的应用前景。 中间纤维蛋白的氨基酸顺序已基本清楚， 许多肽链序列已经测定。研究发现中间纤维蛋白来源于同一基因家族，具有高度同源性。中间纤维蛋白结构特征如图 9－20所示，在中间纤维蛋白分子肽链中部有一段约310个氨基酸残基的 α -螺旋区是高度保守的。两个相邻亚基对应的 α -螺旋区形成双股超螺旋，即40～50nm 的杆部(rod)，组装为中间纤维的主干 (backbone) ，这是5类中间纤维的共同结构特征。同一型的中间纤维蛋白其杆状区氨基酸顺序有 70～90％的同源性，但不同型的中间纤维蛋白的同源性则低于 30％。中间纤维蛋白杆状区由螺旋 1和螺旋2构成，螺旋 1和螺旋2 的长度约为22nm，杆状区长度约在 47nm 左右。螺旋1和螺旋2又可分为 A、B 两个亚区， 4个螺旋区间由3个短片段相连接，其中 L12连接螺旋1和螺旋2，L1和 L2分别连接1A 与1B 和2A 与2B。而中间纤维蛋白分子非螺旋化的头部 (N 端)和尾部(C 端)的氨基酸顺序和肽链长度在各类不同中间纤维蛋白分子中有很大差异。对于每一特定类型的中间纤维蛋白， 其头部和尾部又可进一步分为不同的亚区， (1)H 亚区：同源区； (2)V 亚区：可变区； (3)E 亚区：末端区。根据中间纤维蛋白的氨基酸顺序的同源性，近年对中间纤维成分又提出新的分类：Ⅰ ．酸性角蛋白；Ⅱ．中性和碱性角蛋白； Ⅲ．波形纤维蛋白，结蛋白，胶质纤维酸性蛋白； 57kD 神经中间纤维蛋白；Ⅳ．神经元纤维蛋白；Ⅴ．核纤层蛋白(核内中间纤维蛋白，见后文 )；Ⅵ．nestin ，一种在神经干细胞中发现的蛋白，根据其一级结构确定为中间纤维蛋白 (图9-21)。 图 9 - 19 HeLa 细胞中间纤维 (a)电镜照片(b)荧光显微镜照片II 尸 N－ 末端 杆部 C－末端一 1 lA lB 2A 2B 丿 0 [ L1 L12 眨 ．个 个个个 f ．个个 ．个 个 t 个 t 个 个 ■ ■ (I ) 小昆 59 14 42 94 4 46 119 113 119 84 牛 54 14 42 94 4 46 l T,-4,I r-.-. 1u ,1 ？ r \ ，4 ,1 4Pl 120 15 表 9-3 中间纤维分类 纤维类型 噩白亚基 分子呈 组织来源 角蛋白纤维 角蛋白，19 ..-....- 22 种多肚 40,. 68kD 上皮细胞 波形纤维 波形纤维蛋白，一种多肚 55kD 间质细胞和 中胚层来源的细胞 结蛋白纤维 结蛋白』一种多肚 53kD 肌纽胞 神经无纤维 神经苀纤维蛋白 3 种多肚 68kD 160记 200记3 神经无 神经胶质纤维 胶质纤维酸性蛋白 （ 严 firillaiy ac吐 c protein GFAP) 一种多肚 51kD 神经胶质细胞 二)中间纤维蛋白基因 目前对中间纤维蛋白基因已有所了解，中间纤维蛋白基因含有内含子／外显子结构 (图9－22)， 同型中间纤维蛋白基因具有几乎一致的内含子／外显子结构， Ⅰ-Ⅲ型中间纤维蛋白基因在其顺序组织上相似，Ⅳ型(图9－23)中间纤维蛋白基因在其顺序组织上与Ⅰ -Ⅲ型中间纤维基因有较大差 别。中间纤维蛋白基因定位和调节序列的性质尚不清楚。 中间纤维蛋白基因表达：蛋白表达方式已经清楚，中间纤维蛋白的表达具有严格的组织特异性。中间纤维基因蛋白表达的组织和发育调节可能是在转录和转录后水平，但其规律尚不清楚。 (三)装配 中间纤维蛋白组装为中间纤维的过程如图 9－23所示，中间纤维蛋白的杆部组装为中间纤维的主干(backbone)。 首先，两个相邻亚基的对应 α-螺旋区形成双股超螺旋，即二聚体。研究表明，二聚体中中间纤 维蛋白平行排列，50nm 长。Ⅰ-Ⅱ型中间纤维蛋白分子 (