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蛋白质工程
(2012 某某)8.黄曲霉毒素 B (AFB )存在于被黄曲霉菌污染的饲料中,它可以通过食物链进入动
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物体内并蓄积,引起瘤变。某些微生物能表达 AFB 解毒酶.将该酶添加在饲料中可以降解 AFB ,清除其毒
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性。
回答下列问题:
(1) AFB 属于类致癌因子。
1
(2) AFB 能结合在 DNA 的G 上,使该位点受损伤变为 G ,在DNA 复制中,G 会与 A 配对。现有
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受损伤部位的序列为 ,经两次复制后,该序列突变为。
(3)下图为采用基因工程技术生产AFB 解毒酶的流程图
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据图回答问题:
① 在甲、乙条件下培养含 AFB 解毒酶基因的菌株,经测定,甲菌液细胞密度小、细胞含解毒酶:乙菌
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液细胞密度大、细胞不含解毒酶.过程 l 应选择菌液的细胞提取总 RNA ,理由是
② 过程Ⅱ中,与引物结合的模版是
③ 检测酵母菌工程菌是否合成了 AFB 解毒酶,应采用方法。
1
(4)选取不含 AFB 的饲料和某种实验动物为材料,探究该 AFB 解毒酶在饲料中的解毒效果。实验设
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计及测定结果见下表:
据表回答问题:
① 本实验的两个自变量,分别为。
② 本实验中,反映 AFB 解毒酶的解毒效果的对照组是。
1
③ 经测定,某污染饲料中 AFB 含量为 100 μg/kg ,则每千克饲料应添加克 AFB1 解毒酶.解毒效果最
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好.同时节的了成本。
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(5)采用蛋白质工程进一步改造该酶的基本途径是:从提高每的活性出发,设计预期的蛋白质结构,
推测应有的氨基酸序列,找到相对应的序列。
【答案】(1)化学 (2)
(3)①甲 甲菌液细胞的AFB 解毒酶基因已转录生成了 mRNA,而在乙菌液细胞中该基因未
1
转录 ②AFB 解毒酶基因的 cDNA. ③ 抗原-抗体杂交
1
(4)① AFB1 的有无和AFB1 解毒酶的含量。
② B 组(或 B 组+A 组) ③ 5
(5)脱氧核苷酸序列。
【解析】黄曲霉毒素B1 (AFB1)存在于被黄曲霉菌污染的饲料中,它可以通过食物链进入动物体内
并蓄积,引起瘤变。某些微生物能表达 AFB1 解毒酶.将该酶添加在饲料中可以降解 AFB1,清除其毒性。
(1)黄曲霉毒素B1 (AFB1)是化学物质,AFB1 属于化学类致癌因子。
(2)AFB1 能结合在 DNA 的G 上.使该位点受损伤变为 G ,在DNA 复制中,G 会与 A 配对。
现有受损伤部位的序列为
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