产碱杆菌DN25降氰酶类型判断及其分离纯化的中期报告.docxVIP

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产碱杆菌DN25降氰酶类型判断及其分离纯化的中期报告 产碱杆菌DN25是一株具有高效降解氰化物的细菌,在生物治理氰废水中具有广阔应用前景。本实验旨在对产碱杆菌DN25分离鉴定,并进行降氰酶类型判断及其纯化。 一、产碱杆菌DN25的分离鉴定 取采自含氰化物的土壤样品,在含氰化物培养基上进行筛选,筛选到单一菌落代表性钟形细菌并命名为产碱杆菌DN25。通过形态学观察、生化测试和16S rRNA序列分析进行鉴定,确认其为产碱杆菌属。 二、降氰酶类型判断 根据产碱杆菌DN25降解氰酸盐的反应途径可知,其降氰酶类型应当是氰化物酶。通过测定该菌株培养上清液中的酶活性及特异性反应,得出结论。 三、降氰酶的分离纯化 1. 扩大培养产碱杆菌DN25。制备大量细菌培养上清液。 2. 以氨硫脲沉淀法对细胞外分泌蛋白中的降氰酶进行分离纯化。 3. 对分离纯化的降氰酶进行蛋白质含量测定,酶活力测定,SDS电泳分析等。 目前,我们正在进一步做好纯化,以期获得较纯的降氰酶。 以上是产碱杆菌DN25降氰酶类型判断及其分离纯化的中期报告,谢谢。

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